详细介绍
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
大鼠胃平滑肌细胞 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1301 |
商品介绍:
名称 大鼠胃平滑肌细胞 2.组织来源:胃组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠胃平滑肌细胞分离自胃组织;胃柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和浆膜四层构成。粘膜上皮为柱状上皮。上皮向粘膜深部下陷构成大量腺体(胃底腺、贲门腺、幽门腺),它们的分泌物混合形成胃液,对食物进行化学性消化。粘膜在幽门处由于覆盖幽门括约肌的表面而形成环状的皱襞叫幽门瓣。胃肌膜由三层平滑肌构成,外层纵形,中层环形,内层斜行,其中环形肌,在幽门处特别增厚形成幽门括约肌。胃平滑肌细胞源自胃的平滑肌层,细胞通过紧密连接,进行同步性运动,完成肌肉的舒缩活动,以推动食物前进,完成对食物的机械性消化,并促进化学性消化和吸收。胃平滑肌具有肌组织的共同特性,如兴奋、自律性、传导性和收缩性,在离体后,置于适宜的环境内,仍能进行良好的节律性运动,但其收缩很缓慢,节律性远不如心肌规则。胃平滑肌对电刺激较不敏感,但对于牵张、温度和化学刺激则特别敏感,轻微的刺激常可引起强烈的收缩。胃平滑肌的这一特性是与它所处的生理环境分不开的,胃内容物对平滑肌的牵张、温度和化学刺激是引起内容物推进或排空的自然刺激因素。 5.方法简介: 实验室分离的大鼠胃平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的大鼠胃平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R208 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传5代左右;3代以内状态最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
CD3E & CD3G Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 UNC5B / UNC5H2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 IL22RA1 / IL22R 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠胃平滑肌细胞FAM50B蛋白抗体Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT对基-α-D-半乳糖苷
形成素2抗体(成蛋白)Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT5-尿苷二二钠盐
脂阀结构蛋白1抗体Human CDK16 (Cyclin-dependent kinase 16) ELISA KITDL-苹果酸钙
成纤维生长因子17抗体Human CAND1 (Cullin-associated NEDD8-dissociated protein 1) ELISA KIT移液器P20,单道大龙移液器P20
成纤维生长因子23抗体Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT铁
成纤维生长因子20抗体Human CWF19L1 (CWF19-like protein 1) ELISA KIT人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA试剂盒,
成纤维生长因子19抗体Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT人α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒,IFN-α ELISA kit
成纤维生长因子22抗体Human CLMP (CXADR-like membrane protein) ELISA KIT人抗肝可溶性抗原抗体(SLA)ELISA试剂盒,SLA ELISA