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elisa酶联免疫试剂盒价格包被操作步骤

阅读:355          发布时间:2017-11-1

elisa酶联免疫试剂盒价格操作步骤: 
1.     包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):
将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl, 置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)
2.     封闭酶标反应孔:
5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干,洗涤次数3次
3.     加入待检测样品(建立合适的浓度梯度):
检测时一般采用1:50-1:400的稀释度, 应采用较大稀释体积进行,一般保证样品吸取量>20μl.
将稀释好的样品加入酶标反应孔中,每样品至少加双孔, 每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.
4.     加入酶标抗体:
酶标抗体: 根据酶结合物提供商提供的参考工作稀释度进行. 37℃,30-60min之间.短于30min往往结果不稳定.每孔加100μl.洗涤同前。
5.     加入底物液(现用现配):
TMB-过氧化氢尿素溶液,OPD-过氧化氢底物液系统次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分钟,加入终止液显色.
6.     终止反应:
每孔加入终止液50μl终止反应,于20min内测定实验结果.
7.     elisa酶联免疫试剂盒价格结果判断:
OPD显色后采用492nm波长,TMB反应产物检测需要450nm波长.检测时一定要首先进行空白孔系统调零.用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表示,当P/N大于2时作为抗体的效价.(数值的大小依具体检测要求而定.)
盐酸倍他唑标准品    138-92-1    200mg    Betazole Hydrochloride
盐酸苯丙醇胺标准品    154-41-6     250mg    
盐酸苯海拉明标准品    147-24-0    200mg    Diphenhydramine Hydrochloride
盐酸苯海索标准品    52-49-3     200mg    Trihexyphenidyl Hydrochloride
盐酸苯甲嗪标准品    303-25-3    200mg    Cyclizine Hydrochloride
盐酸比哌立登标准品    1235-82-1    200mg    Biperiden Hydrochloride
盐酸吡多辛标准品    58-56-0     200mg    
盐酸吡格列酮标准品    112529-15-4     50mg    Pioglitazone Hydrochloride 
盐酸吡哌酯标准品    129-77-1     200mg    Piperidolate Hydrochloride 
盐酸苄非他明标准品    5411-22-3    200mg    
盐酸丙胺卡因标准品    1786-81-8     200mg    Prilocaine Hydrochloride
elisa酶联免疫试剂盒价格

 

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