TUNEL Assay Apoptosis Detection Kit(FITC)细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体 DNA 的降解, 这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律,所产生的不同长度的 DNA 片段约为 180 bp-200 bp 的整数倍, 表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的梯状 Ladder 图谱,本试剂盒采用 TUNEL 法,应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶 (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)在凋亡细胞断裂 DNA 的 3´-OH 末端催化掺入 FITC-dUTP 。 FITC-dUTP 标记的 DNA 可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量。TUNEL 法可以选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的 DNA 链断裂的细胞。TUNEL 实验中, TdT 酶催化 dUTP 掺入 断裂的 DNA 链的 3´-OH 末端。抗原标记的 dUTP(如 digoxin-dUTP、生物素-dUTP),因为它可以直接进行原位检测,是一种更快速、直接的检测手段。
组分 | 20T | 50T |
A: TUNEL Equilibration Buffer | 2×1 mL | 5 mL |
B: TUNEL(FITC) Reaction Buffer | 2×0.5 mL | 2×1.25 mL |
C: TdT Enzyme | 20μL | 50μL |
D: Proteinase K (2mg/mL) | 40μL | 100μL |
E: DNase I (2U/μl ) | 5μL | 13μL |
F: 10×DNase I Buffer | 100μL | 260μL |