绵羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒

绵羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。

实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
【产品名称】绵羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Ovine Herpesvirus 1(OHV-2)
【产品编号】YSP7042
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
​
PCR实验方法步骤：
绵羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5   min	1
变性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
终延伸	72℃	5   min	1

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
Magnolol异质性胞核核糖核蛋白A3检测试剂盒20mg

玉米黄质 质量规格：>40% Zeaxanthin

Cantharidin醋阿奈他相关物质A标准品规格：规格：人腺苷高半胱(AdoHcyase)ELISA试剂盒 0.2ml

CLEC4E(Human Ctype lectin domain family 4 member e) ELISA Kit  人C型凝集素结构域家族4成员ECAS号：104286024 生长激素检测试盒10gHuman/人Elisa试盒3096568

Hordenine异质性胞核核糖核蛋白C检测试剂盒20mg

 小鼠白血病细胞英文名称：L1210

Norcantharidin茴香标准品规格：规格：人犬尿氨/线粒体氨基已二转氨酶α(AADAT)ELISA试剂盒 0.2ml

人白介素13(IL13)REG1β/REG1 beta  胰岛细胞再生子β抗体规格:96T/48TApomorphine Hydrochloride规格:1g上腺髓质前体中段肽检测试盒20mg人类星形胶质细胞瘤细胞，U251细胞1x10^6cells

97%500g100g菠萝蛋白酶coronavirus IgM

癸甲酯(分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC)) 质量规格：分析标准品,用于环境分析,≥99.5%(GC) Methyl decanoate

优黑素检测试盒20mg蛋白多糖检测试盒ProteinkinaseA

97%25g5g菠萝蛋白酶coronavirus IgG

 XLD琼脂培养基 规格： 250g 用途： 用于临床标本及食品中志贺氏、沙门氏菌选择性分离。（GB4789.4-2008，FDA BAM chapter5，ISO 657...

Sterile Defidrinated Mouse BloodBR雌1检测试盒20mg蛋白激酶A检测试盒ProteinkinaseB

97%100g25g菠萝蛋白酶periostin

十二甲酯(标准品) 质量规格：分析标准品 Methyl laurate

Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1检测试盒20mg蛋白激酶B检测试盒ProteinKinaseC
绵羊疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒白头翁皂苷E2 CAS号：  规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

白头翁皂苷E1 CAS号：  规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

麦冬黄A; CAS号： 74805928 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

白皮杉; CAS号： 10083246 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

紫草喃A CAS号： 85022668 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

光萼野百合碱;乌沙拉明 光萼猪屎豆碱; CAS号： 15503874 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

罗汉果黄素 CAS号： 156980608 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

罗汉果皂苷IIIe CAS号： 88901375 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

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益母草苷 CAS号： 52949834 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

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α亚麻 CAS号： 463401 规格： HPLC≥98%;0.2ml 订购|咨询

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蓖麻 CAS号：  规格： HPLC≥95%;0.2ml 订购|咨询

4氧水杨 CAS号： 673223 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询