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详细介绍
【产品名称】牡蛎疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Ostreid herpesvirus（OsHV）
【产品编号】YSP7039
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
PCR实验方法步骤：
牡蛎疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
99%5g25g1羟基2基蒽醌7365459alkaline phosphatase
利莫那班羧 质量规格：>98% Rimonabant carboxylic acid
氨基端前心钠肽(NT-ProANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 BPIFB1 / LPLUNC1 蛋白 (His 标签)*250(g)
MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit 人髓样分化子初次应答基88CAS号：104517966 鲨烯合酶检测试盒100gHuman/人Elisa试盒3095952
98%250mg100g1羟基2基蒽醌1132612basic fibroblast growth factor 9
人黑色素瘤细胞英文名称：MV3
氨基端前钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Fc 标签)*250(g)
Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit 人干扰素活化基205CAS号：104376796抗性淀粉检测试盒25gHuman/人Elisa试盒30964002
长梗冬青苷; 具栖冬青甙; 长梗冬青甙钙荧光探针Fluo3, AM 5mg
尼可占替诺（烟占替诺） 英文名称：Xantinol nicotinate (xanthinol nicotinate) 保存：-20℃ 规格：100mg 环指蛋白180抗体
AAT(Alpha1Antitiypsin) α1抗胰蛋白酶(抗原）*谷氨合成酶检测试盒100gHuman/人Elisa试盒4940118
棘苷钙荧光探针Fluo3, AM 5mg
金石蚕苷 英文名称：Jinshi silkworm glycoside 保存：-20℃ 规格：HPLC≥98% 20mg/支 小细胞跨膜糖化蛋白抗体
FPP(Fertilization Promoting Peptide) 受精促进肽进口、分装趋化子CC基元配体15检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4940118
5,6,7,3',4'五基黄BAPTA四钠盐5mg
植钠 质量规格：>98%,BR Phytic acid dodecasodium salt hydrate 3% NaC1鸟氨脱羧酶发酵管BR20支国产/进口
多肽产品 多肽产品进口、原装L乳脱氢酶A链检测试盒500gHuman/人Elisa试盒4940390
牡蛎疱疹病毒探针法荧光定量PCR试剂盒大豆皂苷Ab CAS号： 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
25氧泽泻A CAS号： 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
菜油甾 CAS号： 474624 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
24酰泽泻F CAS号： 规格： HPLC≥97%;5mg 订购|咨询
泽泻B CAS号： 18649939 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
25脱水泽泻A;泽泻G CAS号： 155521463 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
泽泻F CAS号： 155521452 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
青 CAS号： 80286584 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
黄芪中分离物 CAS号： 215776786 规格： HPLC≥98%;5mg 订购|咨询
(3β,6α,16β,20R,24S) CAS号： 1324005517 规格： HPLC≥97%;5mg 订购|咨询
异黄芪皂苷II CAS号： 86764116 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
异黄芪皂苷I CAS号： 84676880 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
8姜 CAS号： 36700455 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
23酰泽泻C CAS号： 26575939 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
麦冬高黄A CAS号： 74805906 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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