竖琴奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒

竖琴奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。

实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
【产品名称】竖琴奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Ostertagia lyrata
【产品编号】YSP7032
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
​
PCR实验方法步骤：
竖琴奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5   min	1
变性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
终延伸	72℃	5   min	1

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
99%500g25g泽泻醇CThyroid stimulating antibody

荧光素(IND) 质量规格：IND Fluorescein 粘蛋白17(MUC17)重组蛋白英文名称：Recombinant Mucin 17 (MUC17)

(+)-Catechin Hydrate安普罗铵标准品规格：规格：人血管生成素1(ANG-1)CLIA试剂盒 0.2ml

Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基CAS号：105816044 二氢辣椒素检测试盒500gHuman/人Elisa试盒30924937

Cholic acid异质性胞核核糖核蛋白L检测试剂盒5mg

紫草 订购|咨询 规格： HPLC≥98%,20mg/支; 粘蛋白7抗体  

EGCG氨力农标准品规格：规格：人血管生成素2(ANG-2)CLIA试剂盒 0.2ml

人白介素2可溶性受体α链(CD25) (IL2sRα )FNDC8  Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体规格:96T/48T规格:15mgLaminin5;Epiligrin检测试盒20mg人结直肠腺癌细胞，COLO320 DM细胞1x10^6cells

98%5g5ml还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(速率微板法)Antitissue transglutaminase IgA antibody

6-羟基烟(分析标准品,≥98.0%(HPLC)) 质量规格：分析标准品,≥98.0%(HPLC) 6-Hydroxynicotinic Acid

紧张素A1检测试盒20mg层粘连蛋白检测试盒highsensitivityCReactiveProtein

Hoechst 33342染色液5mg

 细菌L型增菌液L型细菌增菌培养65克国产/进口

Calf serum诊断试用CD68分子检测试盒20mg超敏C反应蛋白检测试盒SuperOxidaseDimutase

荧光染料333425mg

茚(分析标准品,用于环境分析,>99.0%(GC)) 质量规格：分析标准品,用于环境分析,>99.0%(GC) Indene

Fetal bovine serum(Characterized FBS)BRⅡ型前胶原羧基端肽检测试盒20mg超氧化物歧化酶检测试盒Fibroblastgrowthfactor
竖琴奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒二草莓 CAS号： 97610 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

二石蒜碱 CAS号： 6271212 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

二香素 CAS号： 119846 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

N,N’二蝙蝠葛碱碘物 CAS号：  规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

1,7二羟3,4二氧山7 CAS号：  规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

β，β’二酰阿卡宁 CAS号： 34539656 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

二羟茶碱E CAS号： 117591818 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

二麻醉椒苫素 CAS号： 19902911 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

二醉椒素 CAS号： 587633 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

3,7O二咖酰奎宁 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

3,6O二咖酰奎宁 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

丹叶大黄素 CAS号： 500652 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

冬绿苷 CAS号： 490675 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

地黄苷D CAS号： 81720083 规格： HPLC≥98%;5mg 订购|咨询

地黄苷A CAS号： 81720050 规格： HPLC≥98%;5mg 订购|咨询