当前位置:上海研生实业有限公司>>定量PCR试剂盒>>探针法荧光定量PCR试剂盒>> 50T三叉奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
CAS | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
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分子量 | 详见说明书 | 分子式 | 详见说明书 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
货号 | YSP7037 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 |
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
【产品名称】三叉奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Ostertagia trifurcata
【产品编号】YSP7037
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。
PCR实验方法步骤:
三叉奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
98%100g250mg别育享宾76639946Adipsin
[4-(3-氨基)-3-磺酰 订购|咨询 规格: 50mg 载脂蛋白M抗体 pMHC ELISA Kit 肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒
内皮素转化酶1(ECE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白 (His 标签)*250(g)
人白介素1α (IL1α )RFPL2/RFPL3 RET指蛋白样2/3抗体规格:96T/48TAntazoline Phosphate规格:200mgMEK激酶检测试盒20mg人晶体上皮细胞永生系,SRA01/04细胞1x10^6cells
98%500g1g6羟基奈酚 3芸香糖6葡萄糖苷54238516Procalcitonin
糖精钠-对照品;有报告 订购|咨询 规格: 250mg 肉毒碱棕榈酰基转移酶2抗体 MUC4 ELISA Kit 粘蛋白4(MUC4)ELISA试剂盒
内皮素转化酶1(ECE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 标签)*1000(g)
人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL1sRⅡ)RFPL4A/RNF210 环指蛋白210抗体规格:96T/48TAnthralin规格:1gMEST检测试盒20mg人经典小细胞肺癌细胞,NCIH1688细胞1x10^6cells
97%瓶25gα淀粉酶(枯草杆)Lupus anticoagulant
胆维他;Anethole trithio 订购|咨询 规格: 20mg 骨形态发生蛋白2受体抗体 ORM2 ELISA Kit 类粘蛋白2(ORM2)ELISA试剂盒
ADM (Adrenomedullin)(2252) 上腺髓质素(2252)进口、原装心钠肽检测试盒10gHuman/人Elisa试盒493572
97%10瓶/盒100g胰凝乳蛋白酶(猪)HBcAbIgM
7-表紫杉醇 订购|咨询 规格: 30mg 卷曲螺旋结构域蛋白147抗体 BP ELISA Kit 大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒
ADM (Adrenomedullin)(2242) 上腺髓质素(2242)现货供应Ⅱ型胶原抗体检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4936474
97%500g250mg胰凝乳蛋白酶(猪)HeparinPF4 complex;HIT Antibody
氨甲 订购|咨询 规格: 100mg 人皮质素受体5(MC5-R)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒,英文名:AGEs ELISA Kit
Sterile Defidrinated Sheep BloodBRBK病IgMkan抗体检测试盒20mg促上腺皮质激素检测试盒Oxytocinreceptor
三叉奥斯特线虫探针法荧光定量PCR试剂盒槟榔碱 CAS号: 300083 规格: HPLC≥98%;50mg 订购|咨询
别隐品碱 CAS号: 485916 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
3表中国台湾三尖杉碱 CAS号: 39024152 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
半枝莲碱 CAS号: 176520131 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
白芷属脑 CAS号: 31575936 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
Α波菜甾 CAS号: 481185 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
贝萼皂苷元 CAS号: 6989248 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
白花前胡素 CAS号: 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
扁柏双黄 CAS号: 19202369 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
阿彼斯姆素 CAS号: 103529948 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
澳茄新碱 CAS号: 27028768 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
7氨4香素 CAS号: 26093312 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
9氨喜树碱 CAS号: 91421431 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
阿马碱 CAS号: 483045 规格: HPLC≥98%;100mg 订购|咨询
阿奇 CAS号: 83905015 规格: HPLC≥98%;100mg 订购|咨询
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