脱氮副球菌探针法荧光定量PCR试剂盒

产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
参数规格：
产品名称：脱氮副球菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Paracoccus denitrificans
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX（根据机型决定，具体见使用方法）。
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行）
10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。
​
实验过程：
一、脱氮副球菌探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2．产品仅用于科研对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
以下是公司正在热销的产品：
≥85%5g1g二木蝴蝶素A207089Colon Cancer Antigen

9,10-二基蒽(标准品) 质量规格：分析标准品 9,10-Diphenylanthracene 补体成分4a(C4a)重组蛋白英文名称：Recombinant Complement Component 4a (C4a)

铁蛋白(FE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 FRZB / sFRP-3 蛋白 (His 标签)*250(g)

人胰岛素样生长子结合蛋白4（IGFBP4）caspase9 p10  半胱胺蛋白酶蛋白9p10抗体规格:96T/48TLArginine规格:2gNOD样受体1检测试盒0.2ml人卵巢癌细胞，3AO细胞1x10^6cells

≥99%25g5g6基5,6二2H2100561Contactin 1

天素 订购|咨询 规格： 20mg 蓬乱蛋白2抗体 SNCβ ELISA Kit 突触核蛋白β(SNCβ)ELISA试剂盒

淋巴细胞功能关联抗原2(LFA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 RAB27B 蛋白 (His 标签)*250(g)

人胰岛素样生长子结合蛋白3（IGFBP3）S100A10  S100钙结合蛋白A10抗体规格:96T/48TArginine Hydrochloride规格:1.2ml×3ampulesNOD样受体2检测试盒20mg人卵巢癌细胞，A2780细胞1x10^6cells

Fluo3五铵盐5mg

雌激素 3-甲酯 质量规格：国进口 Estrone 3-methyl ether MFC(小鼠胃细胞)5×106cells/瓶×2gersion

Adenylate Kinase 1 (AK1)  腺苷激酶1进口、分装母亲DPP同源物4检测试盒5gHuman/人Elisa试盒4946149

连翘素Fluo3五盐5mg

鸢尾黄素;Tectorigenin 订购|咨询 规格： 20mg 蛋白激酶A锚定蛋白6抗体 TRAIL-R1 ELISA Kit 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒

Akt/PKB  蛋白激酶B（抗原）进口、原装视网膜母细胞瘤蛋白1检测试盒1gHuman/人Elisa试盒4946149

97%250g5g链蛋白酶Parainfluenzavirus IgG

钩藤碱 订购|咨询 规格： HPLC≥98%,20mg/支 人β胡萝卜素双脱氧酶2(BCDO2)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒，英文名：PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit

Lecithin from egg yolkBR组蛋白去酰化酶1检测试盒20mg多胺检测试盒diamineoxidase
脱氮副球菌探针法荧光定量PCR试剂盒通关藤皂苷I CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

通关藤皂苷G CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

知母皂苷Ａ１ CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

通关藤皂苷H CAS号： 191729450 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

瓜子金皂苷 CAS号： 882664746 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

柳穿鱼黄素 CAS号： 520127 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

戈米辛J CAS号： 66280259 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

伪绵马素 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

仙鹤草D CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

苔黑龙胆二糖苷 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

反式茴香脑 CAS号： 4180238 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

法卡林二 CAS号： 55297875 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

醋棉 CAS号： 12542368 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

柚皮苷二查尔 CAS号： 18916171 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

山姜素 CAS号： 1090659 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询