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详细介绍
实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
【产品名称】普通变形杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Proteus vulgaris
【产品编号】YSP7111
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
优越的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
PCR实验方法步骤：
普通变形杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
指示剂级25g5g楮树黄醇B23513157tartrateresistant acid phosphatase
异甜菊醇 ;isosteviol 规格： 20mg 订购|咨询 中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 标签)*1000 mL/瓶
人8羟基脱氧鸟苷（8OHdG）phosphoCPLA2(Ser505) 化胞浆型脂酶A2抗体规格:96T/48TBehenoyl Polyoxylglycerides规格:10mgα1微球蛋白检测试盒20mg人食管癌细胞，TE1细胞1x10^6cells
指示剂级10g25g桑呋A126192antifilaggrin antibody
亚钠 英文名称：Sodium selenite 保存：-20℃ 规格：50mg 化复制因子A蛋白2抗体
抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)*5000 mL/瓶
VGCC(Human voltagegated calcium channel) ELISA Kit 人钙离子通道抗体CAS号：1545801黄醇合成酶检测试盒100KUHuman/人Elisa试盒313724
Super Fluor 647（效果同Alexa Fluor 647）20mg
龙胆花 英文名称：Gentian flowers 保存：-20℃ 规格：0.5g 高度相似的细胞周期蛋白激酶NEK6抗体
FGF1 (aFGF )(ECGFbeta)(HBGF1) 肝素结合生长子( 性成纤维细胞生长子）（多肽片断抗原）进口、分装酰基化饥饿素检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4998769
Super Fluor 555（效果同Alexa Fluor 555）20mg
豆蔻木脂素 订购|咨询 规格： 20mg 敏感离子通道1抗体 hnRNP L ELISA Kit 异质性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA试剂盒
ECG2 (sophagus cancerrelated gene2) 食道癌相关基（抗原）进口、原装饥饿素检测试盒500gHuman/人Elisa试盒4998769
Super Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488） 20mg
狼毒乙素 英文名称：Fischeriana B 保存：-20℃ 规格：20mg/支 丝氨/苏氨蛋白激酶PCTK2抗体
BGS Agar沙门氏菌分离培养脂肪检测试盒20mg凝血酶原片段F1+2检测试盒coagulationfactorⅡ
普通变形杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒阿卡波糖4Acetoxy3methoxycinnamic acid (HPLC...1G通用试剂
阿卡波糖(标准品)4Fluorophenyl acetate,≥97.0%5G通用试剂
阿昔洛韦,无环鸟苷Tetraethylene Glycol Diptosylate,97%10G通用试剂
阿昔洛韦,无环鸟苷(标准品)Bromotris(dimethylamino)phosphonium He...1G通用试剂
腺苷；腺嘌呤核苷CDP,98%1G通用试剂
腺嘌呤核苷（腺苷）（标准品）1,5Pentanediol,≥97.0%100ML通用试剂
盐阿地芬宁1Isobutoxycarbonyl2isobutoxy1,2di...5G通用试剂
盐阿地芬宁(标准品)Nano fumed silica,100140目500G通用试剂
醋阿拉瑞林/氨瑞林 (S)()3Aminotetrahydrofuran2One H...250MG通用试剂
阿仑Equol,98%250MG通用试剂
阿仑2Methoxy4vinylphenol,≥98%5G通用试剂
别嘌Metyrapone,96%1G通用试剂
别嘌（标准品）D(+)chiroInositol,≥97%20MG通用试剂
基雌;雌Sodium glycocholate hydrate,98%250MG通用试剂
基雌(标准品)Sodium glycochenodeoxycholate,≥97%250MG通用试剂
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