丙酸杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 返回列表页

【产品名称】丙酸杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Propionibacterium spp.
【产品编号】YSP7106
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
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PCR实验方法步骤：
丙酸杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
Ginsenoside Rc胰岛素受体α检测试剂盒10mg

莽草(标准品) 质量规格：HPLC≥98%，标准品 Shikimic acid

Ginsenoside Rb1阿奇霉素标准品(定性用)规格：规格：人解聚酶和金属蛋白酶结构域蛋白29( ADAM 29)Polyclonal Antibody 0.2ml

人骨成型蛋白质受体II（BMP RII）PhosphoNMDAR2B (Tyr1474)  化谷氨受体2B抗体规格:96T/48TBaclofen规格:200mgYes关联蛋白检测试盒20mg人皮质近曲小管上皮细胞，HK2细胞1x10^6cells

Ginsenoside Rh3胰岛素受体β检测试剂盒5mg

 大鼠肝细胞瘤细胞英文名称：H-4-II-E

Ginsenoside Rb2阿奇霉素德糖标准品规格：规格：人血小板结合蛋白基序的解聚蛋白金属蛋白酶18(ADAM-TS 18)Polyclonal Antibody 0.2ml

人骨成型蛋白质受体1A（BMP R1A）PhosphoNMDAR2A + 2B (Tyr1246 + Tyr1252)  化谷氨受体2A+2B抗体规格:96T/48TBaclofen Related Compound A规格:200mgZBED3检测试盒20mg人透明细胞癌细胞，786O细胞1x10^6cells

Dansyl 尸5mg

威(标准品) 质量规格：分析标准品 Tsumacide

Membrane Endo Agar LES膜过滤水中大肠杆菌计数8羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶检测试盒20mg脑钠素;脑钠尿肽检测试盒Brainderivedneurotrophicfacor

bBBr5mg

 大鼠子宫颈上皮细胞*培养基100mL

Endo Agar大肠菌群的检测大肠菌素检测试盒20mg脑源性神经营养子检测试盒endotoxin

mBBr 5mg

三特丁基膦(1.0 M in toluene) 质量规格：1.0 M in toluene Tri-tert-butylphosphine

RVS Broth食品中沙门氏菌检验选择性增菌白细胞介素20检测试盒20mg内素检测试盒Endothelin
丙酸杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒落新妇苷 CAS号： 29838673 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

罗通定 CAS号： 10097844 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

盐氨葡萄糖 CAS号： 66842 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

氨葡萄糖 CAS号： 29031194 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

辛 CAS号： 62464 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

软骨素 CAS号： 9007287 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

咖 CAS号： 331395 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

氧苦参碱 CAS号： 16837528 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

苦参碱 CAS号： 519028 规格： HPLC≥95%;20mg 订购|咨询

苦杏仁苷 CAS号： 29883156 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

绞股蓝皂苷 CAS号：  规格： UV≥98%;20mg 订购|咨询

金丝桃素 CAS号： 548049 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

金丝桃苷 CAS号： 482360 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

莪术 CAS号： 4871970 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

双去氧姜黄素 CAS号： 24939160 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。