SV40T和EBNA1基因修饰细胞;;293ET

SV40T和EBNA1基因修饰细胞;;293ET公司正在销售的产品：磷酸化半胱酸蛋白酶蛋白6抗体Anti-ZW10 peptide 着丝粒蛋白抗体
9号染色体开放阅读框172抗体Anti-Zyxin/ESP 2 斑联蛋白抗体
磷酸化P27抗体/周期素依赖酶抑制剂Anti-Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑联蛋白抗体
表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体Anti-

产品名称：SV40T和EBNA1基因修饰细胞;;293ET

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9819

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
SP-A/FITC 荧光素标记肺表面活性蛋白A抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脱羧酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

原活化蛋白激酶p38抗体  P38 MAPK 0.1ml

surface layer protein 英文名称： 乳酸表面蛋白抗体 0.2ml

ECT2 英文名称： 上皮细胞癌转化蛋白2抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-NFKBIA(Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗体 规格 0.1ml

DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脱羧酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Human PAF (plateletactivating factor) 人血小板活化因子Multi-class antibodies规格： 48T

 CK7 细胞角蛋白7抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nrf2 核因子2相关因子2抗体 规格 0.1ml

Prestained Protein Marker 预染宽范围蛋白质分子量标准(10-170kDa)/10条带 100ul

THOP1 英文名称： Thimet内肽酶抗体 0.2ml

C8orf58 英文名称： 8号染色体开放阅读框58抗体 0.2ml

 CK7 细胞角蛋白7抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Dog IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml

FRMD8 英文名称： FRMD8蛋白抗体 0.2ml

抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗体  HBV/pre S1/S2 protein 0.1ml

 phospho-PKC delta (Tyr311)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚性D型抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-RSK2 (Ser227) 磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体 规格 0.1ml

Donkey  Guinea IgG 驴抗豚鼠IgGMulti-class antibodies规格： 1mg
SV40T和EBNA1基因修饰细胞;;293ETCAPSO. Na；3-(环己)-2-羟基-1-磺酸钠盐紫花前胡素尼罗红染色试剂盒

CAPSO .Na；3-(环己)-2-羟基-1-磺酸钠盐紫堇灵脂质尼罗红染色试剂盒

CAPSO；3-(环己)-2-羟基-1-磺酸 紫杉石蜡切片脂质尼罗红间接染色试剂盒

SBES；2-溴乙基磺酸钠紫杉叶素石蜡切片脂质尼罗红直接染色试剂盒

BICINE；N,N-二羟基甘紫菀酮冻切片脂质尼罗红染色试剂盒

BES sodium salt; N,N-二(2-羟基)-2-氨基乙磺酸钠紫云英苷尼罗红（NILE RED）溶液（0.5毫克/毫升）

BES free acid; N,N-(2-羟)-2-氨基乙磺酸棕榈酸0.1摩尔 （Sodium Dichromate）

黄多糖(68%)总银杏酸

(C13:0,C15:1,C17:1)电融合基质