化工仪器网
详细介绍
细胞特性：
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
产品名称：EBNA1基因修饰;;293E
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9818
细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常
储存条件：2℃-8℃，避光储存
运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
注意事项：
（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤：
一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
TORC1/CRTC1/FITC 荧光素标记环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Defensin Beta1 防御素β1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
重组膜粘连蛋白-5(人)抗体 Annexin V 0.1ml
ZBTB43 英文名称： 锌指蛋白297B抗体 0.2ml
DMPK 英文名称： 肌强直性营养蛋白激酶抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗体 规格 0.1ml
Defensin Beta1 防御素β1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
CD8 CD8抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
CBX5 CBX5抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHB13 原钙粘蛋白13抗体 规格 0.2ml
IL1R2 Kit Human 人 IL1R2 / IL1RB / CD121b ELISA配对抗体 ELISA
THRA1 英文名称： 甲状腺受体α1抗体 0.2ml
Cyclooxygenase 1 英文名称： 前列腺素氧化环化酶1抗体 0.1ml
CBX5 CBX5抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Dog IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml
FAM150A 英文名称： FAM150A蛋白抗体 0.2ml
鼠抗人β亚基人绒毛膜促性腺单抗 β-HCG 0.1ml
Phospho-PKC gamma (Thr514)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Thr 412) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 规格 0.1ml
Mouse Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ链单克隆抗体(亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg
EBNA1基因修饰;;293E5,5-二硫双(2-甲酸)知母皂苷BⅡ10%辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷（Octyl-β-D-thioglucopyranoside）
DIPSO.Na;3-[N-N-双(2-基)氨基]-2-羟基磺酸单钠盐酯蟾配基10%辛基糖苷（Octyl β-D-Glucoside）
DIPSO; 3-[N-N-双(2-基)氨基]-2-羟基磺酸 重楼皂苷I10%CHAPS
顺式2,6-二甲基吗啉重楼皂苷II10%CHAPSO
双十八烷基二甲基溴化铵竹叶香附素A10% SDS
2,3-二巯基磺酸钠梓10％CTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）
CHPS-Na；3-氯-2-羟基磺酸钠紫草酸10％脱氧胆酸纳（Deoxycholic Acid， Sodium salt）
CHES; 2-环己基乙磺酸紫丁香苷蛋白电泳尼罗红染色试剂盒
化工仪器网