产品简介
供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
---|---|---|---|
货号 | GOY-01D2862 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Threonyl tRNA Synthetase 2, Mitochondr |
物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
上海谷研实业有限公司 |
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15026555973 |
参考价 | 面议 |
更新时间:2023-03-22 09:12:43浏览次数:139
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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
---|---|---|---|
货号 | GOY-01D2862 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Threonyl tRNA Synthetase 2, Mitochondr |
物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
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产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
苏氨酰tRNA合成酶2(TARS2)重组蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2862 |
英文名称:Recombinant Threonyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (TARS2)
TARSL1; ThrRS; Threonyl-tRNA synthetase; Threonyl-tRNA Synthetase-Like 1; Threonine tRNA Ligase 2,Mitochondrial
型号:GOY-01D2862
酶与激酶
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:30.5kDa
实际分子量:34kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Cys486~Phe723 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.1
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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