胎盘碱性磷酸酶(ALPP)重组蛋白大鼠 返回列表页

产品属性：

英文名称：Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

PLAP1; ALP; ALPG; ALPPL; GCAP; Alkaline phosphatase Regan isozyme; Placental alkaline phosphatase 1

型号：GOY-01D2133

酶与激酶

代谢通路

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：30.6kDa

实际分子量：33kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Thr68~Ala313 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：8.4

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。
以下是相关产品：

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氨基羧基粘康酸半醛脱羧酶(ACMSD)重组蛋白英文名称：Recombinant Aminocarboxymuconate Semialdehyde Decarboxylase (ACMSD)Picolinate carboxylase; 2-amino-3-carboxymuconate-6-semialdehyde decarboxylase物种：Mouse，小鼠

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操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

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性红183 质量规格：AR, Acid Red 183

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孔雀石绿 质量规格：BS Malachite green

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高盐察氏琼脂 Salt Czapek Dox Agar 250g

50只 专用离心管 (配研磨杵用)   常温

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1次 96孔板血液DNAout（真空法） 96 Microwell Plate Blood DNAOUT 常温

人角化细胞生长因子(KGF)免疫试剂盒进口、组装

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