AMP激活蛋白激酶β1(PRKAb1)重组蛋白人 返回列表页

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Beta 1 (PRKAb1)

AMPK; HAMPKb; 5'-AMP-Activated Protein Kinase Subunit Beta-1 Non-Catalytic Subunit; Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase(AMPK)

型号：GOY-01D505

酶与激酶

代谢通路

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞核, 细胞质

预测分子量：55.9kDa

实际分子量：55.89kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Arg13~Leu242 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：5.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Phosphopantothenoylcysteine Decarboxylase (PPCDC)  产品名称：磷酸泛酰半脱羧酶(PPCDC)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Spermidine Synthase (SRM)  产品名称：亚精胺合酶(SRM)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)  产品名称：基质金属2(MMP2)重组蛋白物种：Chicken (Gallus，鸡)

英文名称：Recombinant Cytochrome C Oxidase Subunit Va (COX5a)  产品名称：氧化酶亚基Ⅴa(COX5a)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Cytochrome C Oxidase Subunit Vb (COX5b)  产品名称：氧化酶亚基Ⅴb(COX5b)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Acyl Coenzyme A Synthetase Medium Chain Family, Member 3 (ACSM3)  产品名称：酰基合成酶中链家族成员3(ACSM3)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

富含跨膜纤连蛋白2抗体 FLRT2

富含跨膜纤连蛋白1抗体 FLRT1

富含跨膜纤连蛋白3抗体 FLRT3

牛原抗体 Bovine Fibrinogen

FAM172A蛋白抗体 FAM172A

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磷酸化粘着斑激酶抗体 Phospho-FAK(Tyr861)

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低转移肺英文名称：95-C

胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL

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大鼠小梁网细胞培养基100mL

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卵黄多粘菌素基础/MYP基础/MYP agar base蜡样芽孢杆菌的固体平板计数250克国产/进口

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氯化三苯四氮唑沙保罗培养基/红四氮唑沙保罗培养基/三苯基氯化四氮唑沙保罗培养基/TTC-Sabourand,s Medium用于分离真菌，酵母菌等250克国产/进口

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胆盐糖培养基/BL培养基/胆盐糖增菌液/糖胆盐增菌液/Bile Lactose Broth大肠杆菌和绿脓杆菌的增菌培养250克国产/进口