磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重组蛋白 返回列表页

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)

PEPCK1; PEPCKC; Cytosolic Phosphoenolpyruvate Carboxykinase; Phosphoenolpyruvate carboxykinase, cytosolic [GTP]

型号：GOY-01D376

酶与激酶

代谢通路

内分泌学

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：31.9kDa

实际分子量：27kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile312~Ala563 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：7.8

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK)  产品名称：整合素连锁激酶(ILK)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Adenylate Kinase 2 (AK2)  产品名称：腺苷酸激酶2(AK2)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Coenzyme Q6 Homolog, Monooxygenase (COQ6)  产品名称：辅酶Q6同源物A(COQ6)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 4 (GSTm4)  产品名称：S转移酶μ4(GSTm4)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1)  产品名称：蛋白O-甘露糖基转移酶1(POMT1)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)  产品名称：CD38分子(CD38)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

二肽基肽酶10抗体 DPP10

DNA甲基转移酶3L抗体 Dnmt3L

二肽氨基肽酶3抗体 DPP3

DNA复制相关元件结合因子抗体 DREF

B淋巴细胞转录调节相关蛋白DRIL1抗体 DRIL1

转录共激活因子130抗体 DRIP130

核糖核酸酶3/Drosha抗体 Drosha

脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体 DTYMK

双特异性蛋白磷酸酶5抗体 DUSP5

磷酸化酶动力蛋白1抗体 phospho-Dynamin 1 (Ser774)

双特异性蛋白磷酸酶10抗体 DUSP10

酶动力蛋白1抗体 Dynamin 1

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重组蛋白COLO 320DM(人结直肠腺细胞)kasumi-1, 人白血病细胞株

栗色浑圆链霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

发根根瘤菌 Rhizobium rhizogenes

小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞培养基100mL

KP-N-NS(人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移))5×106cells/瓶×2

IM-9(人外周血B淋巴细胞)RA, 大鼠星形胶质细胞

胶韧革菌大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

灵芝 Ganoderma lucidium圆弧青霉 Penicillium cyclopium

苜蓿中华根瘤菌

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大鼠神经元细胞培养基100mL

小鼠淋巴管内皮细胞培养基100mL

农杆菌 Agrobacterium sp.假单胞菌 Pseudomonas sp.