内皮型一氧化氮合酶(eNOS)重组蛋白猪 返回列表页

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Endothelial NOS (eNOS)

NOS3; ECNOS; NOS III; E-NOS; C-NOS; ENOS; CNOS; Constitutive NOS; Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial

型号：GOY-01D358

酶与激酶

心脑血管

物种：Sus scrofa; Porcine (Pig，猪)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：Membrane, caveola. Cytoplasm, cytoskeleton. Golgi apparatus. Cell membrane

预测分子量：21.9kDa

实际分子量：21kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ala522~Phe705 (Accession # Q28969) with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：6.1

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Phosphoinositide-3-Kinase Class 3 (PIK3C3)  产品名称：磷酸肌醇-3-激酶3(PIK3C3)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Myosin Light Chain Kinase 3 (MYLK3)  产品名称：肌球蛋白轻链激酶3(MYLK3)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Component X (PDHX)  产品名称：丙酮酸脱氢酶复合体成分X(PDHX)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Alpha 2 (PRKAa2)  产品名称：AMP激活蛋白激酶α2(PRKAa2)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Beta 2 (PRKAb2)  产品名称：AMP激活蛋白激酶β2(PRKAb2)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant WNK Lysine Deficient Protein Kinase 1 (WNK1)  产品名称：WNK赖缺乏蛋白激酶1(WNK1)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

阳离子通道精相关蛋白2抗体 CATSPER2

4号染色体开放阅读框28抗体 C4orf28

阳离子通道精相关蛋白3抗体 CATSPER3

液泡蛋白分选蛋白VPS13A抗体 Chorein/VPS13A

钙调磷酸酶B相关蛋白2抗体 Chp2

CHRAC1蛋白抗体 CHRAC1

ATP依赖的解螺旋酶抗体 CHD9

X染色体开放阅读框6抗体 CXorf6

碳水化合物磺基转移酶10抗体 CHST10

碳水化合物磺基转移酶11抗体 CHST11

酶2抗体 CHSS2

碳水化合物磺基转移酶12抗体 CHST12

内皮型一氧化氮合酶(eNOS)重组蛋白猪戊糖杆菌 Lactobacillus pentosusHela, 人宫颈细胞系

大鼠食管上皮细胞培养基酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

直丝紫链霉菌 Streptomyces rectiviolaceus 细胞名称

嗜热链球菌 Streptococcus thermophilusHL-60, 人早幼粒白血病细胞

依维林链霉菌 Streptomyces iverini酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes冻胶假丝酵母 Candida gelida

显影粉刺孢吸水链霉菌 Streptomyces hygrospinosus

NRK(大鼠肾细胞)粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis黑木耳 Auricularia auricula

亮白曲霉 Aspergillus candidus小鼠成骨细胞培养基

PBS圆弧青霉 Penicillium cyclopium

苜蓿中华根瘤菌炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum猴菌