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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D354 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2) |
物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)重组蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D354 |
英文名称:Recombinant Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)
PLA2G7; PAF-AH; PAFAH; Lp-PLA2; LDL-PLA2; Platelet Activating Factor Acetylhydrolase,Plasma; Phospholipase A2,Group VII; LDL-associated phospholipase A2; Phospholipase A2, Lipoprotein Associated
型号:GOY-01D354
酶与激酶
代谢通路
感染免疫
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌, 细胞外基质
预测分子量:48.1kDa
实际分子量:48kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Phe22~Asn440 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:6.6
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
微管结合蛋白CYLD抗体 CYLD
磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 phospho-MCSF Receptor(Tyr923)
磷酸化微管结合蛋白CYLD抗体 phospho-CYLD (Ser418)
磷酸化CBX5抗体 Phospho-CBX5 (Tyr37)
氯抗体 Chloramphenicol
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磷酸化细胞质膜微囊蛋白-1抗体 Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)
磷酸化周期素依赖激酶2抗体 Phospho-cdc2 (Thr161)
磷酸化周期素依赖性激酶2抗体 Phospho-CDK2 (Thr160)
细胞质膜微囊蛋白-3抗体 Caveolin-3
磷酸化细胞分裂周期蛋白25C抗体 Phospho-cdc25C (Thr48)
3号染色体开放阅读框34抗体 C3Orf34
脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)重组蛋白小鼠苏云金芽胞杆菌托马诺夫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. toumanoffii纤维素链霉菌 Streptomyces cellulose
Caco-2(人结直肠腺细胞)Sf-9(昆虫细胞)
嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes白地霉 Geotrichum candidum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaNCI-H446(人小细胞肺细胞)
Bacterial Protein Extraction Reagent/细菌蛋白抽提试剂 细胞名称
绳状青霉 Penicillium funiculosum酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人肺细胞真核细胞膜蛋白抽提试剂(带酶抑制剂)
人胰腺星状细胞培养基RF/6A(猴视网膜血管内皮细胞)
葡萄球菌属 Staphylococcus sp.小肠结肠炎耶尔森氏菌 Yersinia enterocolitica
根瘤菌MDA-MB-231, 人腺细胞
麦角甾苷大鼠小梁网细胞培养基
毛木耳 Auricularia polytricha植物杆菌 Lactobacillus plantarum
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