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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D347 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Glycogen Phosphorylase, Liver (PYGL) |
物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
糖原磷酸化酶L(PYGL)重组蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D347 |
产品名称:糖原磷酸化酶L(PYGL)重组蛋白小鼠
英文名称:Recombinant Glycogen Phosphorylase, Liver (PYGL)
GPLL; GPBB; Hers Disease; Glycogen Storage Disease Type VI
型号:GOY-01D347
酶与激酶
代谢通路
内分泌学
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
C型凝集素结构域家族5成员A抗体 CLEC5A
半胱胺酸蛋白9-p10抗体 caspase-9 p10
周期素依赖激酶1抗体 CDK1
细胞衰老抑制基因抗体 RSL1D1
环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体 CREB-1
酪蛋白激酶1γ1抗体 CSNK1G1
21号染色体开放阅读框88抗体 C21orf88
21号染色体开放阅读框54抗体 C21orf54
周期素依赖性激酶9抗体 Cyclin T1
细胞分裂周期蛋白6抗体 Cdc6
细胞周期检测点激酶2抗体 CHK2
细胞周期调控因子34 CDC34
糖原磷酸化酶L(PYGL)重组蛋白小鼠小鼠直肠平滑肌细胞培养基UACC-812(人腺导管瘤细胞)
杆菌属 Lactobacillus sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
串珠镰孢 Fusarium moniliforme印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
热带假丝酵母 Candida tropicalisSV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞)
杆菌 Lactobacillus sp.
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
弗氏链霉菌 Streptomyces fradiae
戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceusMN-c, 小鼠皮质神经元
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
T24, 人膀胱细胞人前列腺成纤维细胞培养基
丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-转化人淋巴细胞
香菇属 Lentinula sp.
松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii
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