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糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白大鼠

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所  在  地上海市

更新时间:2023-03-06 09:34:40浏览次数:151次

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供货周期 现货 规格 10μg50μg200μg1mg5mg
货号 GOY-01D345 应用领域 化工
主要用途 仅供科研实验 英文名称 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)
物种 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白大鼠公司正在出售的产品:人白介素13受体α-2(IL13RA2)ELISA试剂盒96T 0.312-20 ng/mL人内凝集蛋白-1(ITLN-1)ELISA试剂盒96T 0.78-50 ng/mL人抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒96T 15.6-1000 pg/mL

以下是相关产品:

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产品属性:

产品名称

物种

货号

糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D345

 

 

英文名称:Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

GPMM; Phosphorylase,Glycogen; McArdle Syndrome,Glycogen Storage Disease Type V; Myophosphorylase

型号:GOY-01D345

酶与激酶

代谢通路

内分泌学

物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::n/a

预测分子量:-

实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:N-terminal His Tag

缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性状:冻干粉

纯度:> 97%

等电点:-

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。

操作步骤:

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2.  每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;

4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107个

0.5 mL~1 mL

5×106个

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;

6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品:

泛素连接酶CUL7蛋白抗体 Cullin 7

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甲状腺受体相互作用蛋白15抗体 COPS2

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信号转导蛋白亚基4抗体 COPS4

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CAP1抗体 CAP1

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3抗体 CSF3

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CRTAM抗体 CRTAM

细胞表面趋化因子受体7抗体 CCR7

单核细胞趋化蛋白4抗体 MCP4

糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白大鼠小鼠视网膜muller细胞培养基小鼠子宫平滑肌细胞培养基

宇佐美曲霉变种 Aspergillus usamii var.HFF-1(人成纤维细胞)

植物杆菌 Lactobacillus plantarum酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

刺孢吸水链霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛罗里达侧耳 Pleurotus florida

人脑胶质瘤细胞田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans

人小梁网细胞培养基异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala

鸭沙门氏菌 Salmonella anatum米曲霉 Aspergillus oryzae

PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)大鼠肠平滑肌细胞培养基

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSaos-2,人成骨肉瘤细胞

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis洛格酵母 Saccharomyces logos

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

Goat Anti Rabbit IgG-Biotin(Ready to Use)/山羊抗兔IgG,Biotin(IHC工作液)UM-UC-3, 人膀胱移行细胞

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii漏斗状侧耳 Pleurotus sajor-caju

 

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