糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白人 返回列表页

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

GPMM; Phosphorylase,Glycogen; McArdle Syndrome,Glycogen Storage Disease Type V; Myophosphorylase

型号：GOY-01D343

酶与激酶

代谢通路

内分泌学

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：21.7kDa

实际分子量：26kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Arg11~Gly187 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：5.6

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)  产品名称：NADH脱氢酶1(ND1)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (PDE5A)  产品名称：磷酸二酯酶5A(PDE5A)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Matrix Metalloproteinase 23A (MMP23A)  产品名称：基质金属23A(MMP23A)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Transglutaminase 6 (TGM6)  产品名称：转酶6(TGM6)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Pancreatic Lipase (PL)  产品名称：胰脂肪酶(PL)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2)  产品名称：cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(PRKG2)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

半胱胺酸蛋白-6抗体（C端） Caspase-6 (CT)

钙调节蛋白-1抗体 Calponin 1

周期素A2抗体 Cyclin A2

钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 CaMK2 alpha

钙/钙调素依赖蛋白激酶2b/2γ抗体 CaMK2 beta gamma delta

细胞凋亡敏感性基因抗体 Exportin-2

天冬-特异性家族抗体 Caspase-1 P10

半胱胺酸-10抗体 Caspase-10

半胱胺酸蛋白-13抗体 Caspase-13 + 4

CD10抗体 CD10

半胱胺酸蛋白-12抗体 Caspase-12

CD105抗体 CD105

糖原磷酸化酶M(PYGM)重组蛋白人人气管平滑肌细胞培养基紫红曲霉 Monascus purpureus

百脉根根瘤菌 Rhizobium loti酸球菌脂亚种 Lactococcus lactis subsp. cremoris

植物杆菌 Lactobacillus plantarum酒假丝酵母 Candida kefyr

Ampicillin(100mg/ml,1000X)鬼伞属 Bradyrhizobium vigna

杆菌 Lactobacillus sp.三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii

 正常细胞一步法Western专用封闭液

豹皮香菇 Lentinus lepideusP19(小鼠畸胎瘤细胞)

负鼠肾细胞香菇 Lentinula edodes

猴菌酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠神经干细胞（EGFP标记）冻胶假丝酵母 Candida gelida

人十二指肠腺细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

粗状假丝酵母 Candida valida不动杆菌 Acinetobacter sp.

腊状芽胞杆菌 Bacillus cereusSaos-2(人骨肉瘤细胞)