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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D269 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant?Myeloperoxidase?(MPO) |
物种 | Sus?scrofa;?Porcine?(Pig,猪) |
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
髓过氧化物酶(MPO)重组蛋白猪 | Sus scrofa; Porcine (Pig,猪) | GOY-01D269 |
英文名称:Recombinant Myeloperoxidase (MPO)
酶与激酶
型号:GOY-01D269
感染免疫
心脑血管
肝胆病学
物种:Sus scrofa; Porcine (Pig,猪)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
羧肽酶X(M14家族1)抗体 CPXM
细胞分裂周期37样蛋白1抗体 CDC37L1
卷曲螺旋结构域蛋白135抗体 CCDC135
跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体 CEE
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免超家族成员16抗体 IGSF16
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大鼠卵巢颗粒细胞培养基香菇 Lentinula edodes
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum人咽鳞细胞
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilusFaDu(人咽鳞细胞)
土正青霉 Eupenicillium terrenum瑞士杆菌 Lactobacillus helveticus
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti链霉菌 Streptomyces sp.
大鼠输尿管上皮细胞培养基小鼠肺血管平滑肌细胞培养基
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii镰刀菌 Fusarium sp.
葡枝根霉 Rhizopus stoloniferOne StepWestern Kit AP(Rabbit)/一步法快速WB(AP)试剂盒(兔)
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus球毛壳 Chaetomium globosum
双孢蘑菇鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum短短芽胞杆菌 Brevibacillus brevis
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