颗粒酶M(GZMM)重组蛋白小鼠 返回列表页

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

产品名称：颗粒酶M(GZMM)重组蛋白小鼠

英文名称：Recombinant Granzyme M (GZMM)

GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease

型号：GOY-01D194

酶与激酶

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：55.0kDa

实际分子量：55kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Arg31~Arg257 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：8.9

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

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英文名称：Recombinant Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Delta Polypeptide (PIK3Cd)  产品名称：磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cd)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

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操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

磷酸化周期素依赖性激酶7抗体 phospho-CDK7 (Thr170)

2号染色体开放阅读框60抗体 C2orf60

磷酸化周期素依赖性激酶9抗体 Phospho-CDK9 (Thr29)

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磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 phospho-CHEK1(Ser317)

磷酸化抑癌基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser140)

磷酸化抑癌基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser152)

磷酸化抑癌基因p16抗体 phospho-CDKN2A (Ser8)

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磷酸化N-钙粘附分子抗体 phospho-CDH2 (Tyr820)

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酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人星形胶质细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens

暗产色链霉菌 Streptomyces phaeochromogenes

膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

MDA-MB-468(人腺细胞)无色透链霉菌 Streptomyces hyalinum

大鼠角膜内皮细胞培养基小鼠结肠平滑肌细胞培养基

植物杆菌 Lactobacillus plantarumRKO-AS45-1(人结肠转基因细胞)

泡盛曲霉 Aspergillus awamori泡盛曲霉 Aspergillus awamori

浅玫瑰链霉菌 Streptomyces roseolus