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钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白人

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所  在  地上海市

更新时间:2023-03-02 16:00:05浏览次数:274次

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供货周期 现货 规格 10μg50μg200μg1mg5mg
货号 GOY-01D190 应用领域 化工
主要用途 仅供科研实验 英文名称 Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent
物种 Homo sapiens (Human,人)
钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白人公司正在出售的产品:人纤毛轴动力蛋白重链17(DYH17)ELISA试剂盒96T 0.312-20 ng/mL人Dickkopf 相关蛋白4(Dickkopf-4)ELISA试剂盒96T 0.156-10 ng/mL人损伤调节自噬调节蛋白1(DRAM1)ELISA试剂盒96T 0.156-10 ng/mL

以下是相关产品:

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英文名称:Recombinant Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1)  产品名称:二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)重组蛋白物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

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产品属性:

产品名称

物种

货号

钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D190

 

 

产品名称:钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白人

英文名称:Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

PLA2G6; CaI-PLA2; GVI; INAD1; PNPLA9; Ca2+ Independent PLA2; 85 kDa Calcium-Independent Phospholipase A2; Phospholipase A2,group VI(Cytosolic,Calcium-Independent)

型号:GOY-01D190

酶与激酶

代谢通路

物种:Homo sapiens (Human,人)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::细胞质

预测分子量:32.0kDa

实际分子量:29kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Arg484~Ile701 with N-terminal His Tag

缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性状:冻干粉

纯度:> 97%

等电点:9.4

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。

操作步骤:

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2.  每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;

4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107个

0.5 mL~1 mL

5×106个

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;

6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品:

钙调节素抗体(钙调蛋白/钙调素) Calmodulin

半胱胺酸蛋白-7抗体 Caspase-7

1号染色体开放阅读框181抗体 C1orf181

Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体) CD35

8型胶原/内皮胶原蛋白抗体 Collagen VIII alpha 1

结合转化激活因子CITED1抗体 CITED1

细胞色素P450 2C9抗体 CYP2C9

细胞色素P450 2D6抗体 CYP2D6

前列环素合成酶抗体 CYP8A1

软骨寡聚基质蛋白抗体 COMP

血小板活化因子CTR9抗体 CTR9

T淋巴细胞CD1A抗体 CD1A

钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白人A2780(人卵巢细胞)A3(人T淋巴细胞白血病细胞)

抗生链霉菌 Streptomyces antibioticus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

酸球菌 Lactococcus lactis地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis

MFC-GFP(小鼠前胃细胞(绿色荧光蛋白标记))牛链球菌 Streptococcus bovis

紫芝 Ganoderma japonicum香菇 Lentinula edodes

大鼠膀胱成纤维细胞培养基LS-174T(人结肠腺细胞)

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus

人胰岛β细胞培养基大鼠肠粘膜上皮细胞培养基

柱状田菇 Agrocybe aegerida施氏汉逊酵母 Hansenula schneggii

鞘氨醇杆菌属 Sphingobacterium sp.中间假丝酵母 Candida intermedia

人黑色素瘤细胞白盘孢 Gloeosporium album

大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)人真皮淋巴上皮细胞培养基

中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii小鼠小肠粘膜上皮细胞培养基

 


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