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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D179 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15) |
物种 | Sus scrofa; Porcine (Pig,猪) |
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
基质金属蛋白酶15(MMP15)重组蛋白猪 | Sus scrofa; Porcine (Pig,猪) | GOY-01D179 |
产品名称:基质金属蛋白酶15(MMP15)重组蛋白猪
英文名称:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)
SMCP-2; MTMMP2; MT2-MMP; Membrane-Inserted; Membrane-type matrix metalloproteinase 2; Membrane-type-2 matrix metalloproteinase
型号:GOY-01D179
酶与激酶
感染免疫
物种:Sus scrofa; Porcine (Pig,猪)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
21号染色体开放阅读框66抗体 C21orf66
1号染色体开放阅读框58抗体 C1orf158
CDC42效应蛋白3抗体 CDC42EP3
7号染色体开放阅读框43抗体 C7orf 43
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-ABL (Tyr115)
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-Abl (Thr754 + Thr735)
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-ABL (Tyr245)
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-ABL(Thr413)
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-ABL (Thr754)
精尾部结构蛋白抗体 Cenexin1
磷酸化非受体激酶c-Abl抗体 phospho-c-ABL(Tyr204)
5号染色体开放阅读框19抗体 C5orf19
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串珠菌 Leuconostoc lactisCoC1(人卵巢细胞)
果香地霉 Colletotrichum musae酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum枝芽胞菌 Virgibacillus sp.
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii人胶质母细胞瘤细胞
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeBRL(大鼠肝细胞)
鼠伤 Salmonella typhimuriumRaji,人Burkitt's淋巴瘤细胞
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti三硝基苯甲基硝胺梭菌 Clostridium tetryl
大肠杆菌 Escherichia coli紫产色链霉菌直丝变种 Streptomyces Violochromogenes var. rectus
大鼠肾实质细胞培养基小鼠肥大细胞细胞
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