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供货周期 | 现货 | 规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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货号 | GOY-01D159 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研实验 | 英文名称 | Recombinant Cathepsin K (CTSK) |
物种 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) |
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。
产品属性:
产品名称 | 物种 | 货号 |
组织蛋白酶K(CTSK)重组蛋白兔 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) | GOY-01D159 |
产品名称:组织蛋白酶K(CTSK)重组蛋白兔
英文名称:Recombinant Cathepsin K (CTSK)
CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X
型号:GOY-01D159
酶与激酶
感染免疫
骨骼代谢
物种:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞膜, 分泌, 溶酶体
预测分子量:27.3kDa
实际分子量:31kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Thr115~Met329 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.0
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
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操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
公司正在出售的产品:
细胞表面趋化因子受体1抗体 CXCR1
间隙连接蛋白45抗体 Connexin-45
细胞色素P450单氧化酶抗体 CYP450
抗体 Cytochrome C
细胞角蛋白1抗体 CK1
巨细胞病毒PP65/CMV低基质磷脂蛋白抗体 Cytomegalovirus pp65
周期素C抗体 Cyclin C
周期素B1抗体 Cyclin B1
周期素D1抗体 Cyclin D1
周期素D2抗体 Cyclin D2
细胞球蛋白抗体 Cytoglobin
周期素E抗体 Cyclin E
组织蛋白酶K(CTSK)重组蛋白兔植物杆菌 Lactobacillus plantarum酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes微小链霉菌 Streptomyces parvullus
圆酵母菌属 Torula sp.HMy2.CIR(人B淋巴母细胞)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna粘红酵母 Rhodotorula glutinis
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae热带假丝酵母 Candida tropicalis
Lncap clone FGC(人前列腺细胞)大鼠颌下腺上皮细胞培养基
苜蓿中华根瘤菌屎肠球菌 Enterococcus faecium
RSC, 大鼠雪旺细胞天蓝色链霉菌 Streptomyces coelicolor
异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala人神经元细胞培养基
HEC-1-A(人子宫内膜腺细胞)大鼠冠状动脉内皮细胞培养基
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes酸片球菌 Pediococcus acidilactici
人前列腺平滑肌细胞培养基黑曲霉 Aspergillus niger
中分子量单一蛋白Marker(27 kD)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
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