当前位置:上海谷研实业有限公司>>分子生物学试剂>>核酸扩增>> 10mLPCR Mix染料
供货周期 | 现货 | 货号 | GOY-F10268 |
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应用领域 | 化工 | 主要用途 | 仅供科研使用 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
PCR Mix Dye | 10mL | GOY-F10268 |
产品详细介绍:
本产品可加入到PCR反应液中,使PCR产物可直接上样电泳,其分子量相当于50bp大小的DNA片段,不干扰观察。 注:本产品不是PCR荧光染料,是一类可见光染料(类似电泳用的溴酚蓝,二甲苯蓝等指示剂) 储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人纤维蛋白(FBL)酶联吸附测定试剂盒 Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 中文名:异绿原酸A 分子式:C25H24O12 度:98.0%
人纤溶抑制因子(TAFI)酶联吸附测定试剂盒 Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名:3,6-双(羟甲基)杜烯 分子式:C12H18O2
人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒 人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒、人细胞外基质0酸糖蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 1521197-43-2 中文名: 分子式:C16H15ClN4O
人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISAKit 2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS
人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISAKit 2-Aminonicotinic acid 中文名:2-氨基 分子式:C6H6N2O2 度:98.0%
SB 203580 SB203580 质量规格:>98%,p38 MAPK抑制剂 英文名称RatThromboxaneB2ELISAKit大鼠血栓素(TXB2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
6-氨基-3-甲基嘌呤(3MA);细胞自噬抑制剂 3-MA;6-Amino-3-methylpurine 质量规格:HPLC≥97%,autophagy inhibitor 寡核苷酸探针非同位素HRP化学发光法DNA斑点杂交*试剂盒5
;2,6-二羟基嘌呤; 2,6-Dihydroxypurine;Xanthine 质量规格:>99%,BR ELISAKitIGFBP-3人胰岛素样生长因子结合蛋白3规格:48T/96T
Necrostatin1 Necrostatin-1 质量规格:>98%,RIP1抑制剂 小鼠7(KLK7)ELISA试剂盒 ,英文名: KLK7 ELISA Kit
大豆分离蛋白 Soy protein isolate 质量规格:蛋白含量≥90%,BR 人迟现抗原(VLA)ELISA检测试剂盒Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 96T/48T
L-甲状钠盐五水化合物 L-Thyroxine Salt Pentahydrate 质量规格:>98%,BR 大鼠心肌肌钙蛋白C(TnC)试剂盒 Rat Cardiac oponin C,cTn-C ELISA kit
LY2940680 LY2940680 质量规格:>98% 英文名称RatTpPELISAKit大鼠血栓前体蛋白(TpP)。规格:96T/48T
LY2886721 LY-2886721 质量规格:>98,BACE1 inhibitor 寡核苷酸探针非同位素HRP化学发光法DNA南方杂交*试剂盒5
利尼伐尼;ABT869 Linifanib (ABT-869) 质量规格:>98%,VEGFR/PDGFR抑制剂 ELISAKitIGFBP2人胰岛素样生长因子结合蛋白2规格:48T/96T
头孢匹林钠(标准品) Cefapirin 质量规格:含量测定 小鼠5(KLK5)ELISA试剂盒 ,英文名: KLK5 ELISA Kit
PCR Mix染料(正铁-氧化还原酶)活性定量检测试剂盒
动物线粒体呼吸链复合物IV
动物线粒体呼吸链复合物III(-还原酶)活性
动物线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸-还原酶)活性定量检测试剂盒
动物线粒体呼吸链复合物I(NADH-还原酶)活性定量检测试剂盒
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