DNA Shuffling试剂盒 返回列表页

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产品详细介绍：

DNA提取流程图：

实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人整合素连接激酶1elisa试剂盒   人整合素连接激酶1试剂盒   规格型号：96T/48T   人整合素连接激酶1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人整合素连接激酶1试剂盒、人整合素连接激酶1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S 

人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒     2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S  度：98.0%   

人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISAKit     2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS  度：98.0%   

人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)ELISA试剂盒     2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S 

人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒     2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS  度：98.0%
DL-苦杏仁酸  DL-Mandelic acid  质量规格：AR Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISA试剂盒人抗神经节苷脂抗体(GM1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

抗坏血酸；C  Ascorbic acid；vitamin C  质量规格：AR;>99% 植物可溶性酸性蔗糖转化酶(acidinvease)活性比色法定量检测试剂盒(液泡)20

C(标准品)  Ascorbic acid；vitamin C  质量规格：含量测定 HumanVitaminDReceptor,VDRELISAKit人D受体(VDR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺  Octadecanamine  质量规格：AR 小鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒 ，英文名： PTH ELISA Kit

山梨酸  Sorbic acid  质量规格：AR,99% 大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA检测试剂盒Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 96T/48T

卢立康唑  Luliconazole  质量规格：>98%,BR 人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)试剂盒 Human PRF1/PFP ELISA Kit

5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基邻菲啰啉  5-Nitro-1,10-phenanthroline  质量规格：>97%,BR RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

铁冬青酸(标准品)  Rotundic acid  质量规格：HPLC≥98%,标准品 INSULIN蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25

酚蓝钠  Bromophenol blue  salt  质量规格：AR Peanagglinin,PNAELISA试剂盒花生凝集素(PNA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

百里香酚兰钠  Thymol blue  salt  质量规格：AR 小鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA 试剂盒
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