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小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法 英文名称:Mouse luteotropic hormone,LH ELISA Kit 检测方法:elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存,操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题,收货后十五个工作日内包退换。
英文名称:Mouse luteotropic hormone,LH ELISA Kit
规格:96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状:盒装液体
人白介素2受体(IL-2R)Elisa测定试剂盒用途:科研与实验试剂,不得用于临床诊断。
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 缓冲液使用:加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。
小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或 者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上 清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法操作步骤:
1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。
2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。 注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸*拍干。
7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。 9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。
注意事项:
1. 实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样时,要控制加样速度,避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商, 如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法安全性
1. 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
土曲霉 Aspergillus terreus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
巴斯德毕赤酵母 Pichia pastoris
猪霍乱沙门氏菌孔成道夫变种 Salmonella cholerae-suis var. kunzendorf
小鼠肺大动脉平滑肌细胞*培养基100mL
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
PA319(人大肠细胞)5×106cells/瓶×2
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
根瘤菌
人神经小胶质细胞*培养基100mL
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
HEC-1-B(人子宫内膜腺细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠畸胎瘤细胞英文名称:Pcc4
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
Swiss albion小鼠胚胎成纤维细胞英文名称:3T6
灵芝 Ganoderma lucidium
小鼠淋巴成纤维细胞*培养基100mL
KB(人口腔表皮样细胞)5×106cells/瓶×2
沟肠杆菌 Enterobacter cloacae
细胞名称 种属
IM-9(人外周血B淋巴细胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
粗柄羊肚菌 Morchella crassipas
JEC, 人子宫内膜腺细胞系
小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记)
紫孢侧耳(美味侧耳) Pleurotus sapidus N-DBZ
N,N’-(Methylenedi-4,1-phenylene)bis-acetamide, N,N’-(Methylenedi-4,1-phenylene)diacetamide, NSC 12407FH1 (BRD-K4477)
Glucose AGE-BSA-IIGlucose AGE-BSA-II
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Low, pH – 7.0
Bafilomycin A1 (500 ug)-(1-methylethyl)-2H-pyran-2-yl]butyl]-3,15-dimethoxy-5,7,9,11-tetramethyl-oxacyclohexadeca-3,5,11,13-tetraen-2-one; NSC 381866; Bafilomycin A1
Ac-Pro-Ala-Leu-rhodamine 110Ac-Pro-Ala-Leu-rhodamine 110
Calyculin ACalyculin A
D-myo-Inositol-3,4,5-triphosphate -sodium salt) (5 mg)Ins(3,4,5)-P3|3,4,5-IP4, D-myo-Inositol-3,4,5-triphosphate -sodium salt), D-myo-inositol-3,4,5-tris(hydrogen phosphate), trisodium salt
Bupropion -hydrochloride) (1 g)NSC 315851, Bupropion -hydrochloride), 1-(3-chlorophenyl)-2-[(1,1-dimethylethyl)amino]-1-propane, monohydrochloride
11-deoxy Prostaglandin E2 (100 mg)11-deoxy PGE2, 11-deoxy Prostaglandin E2, 9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
Latanoprost Lactol (100 mg)Latanoprost Lactol, (3aR,4R,5R,6aS)-hexahydro-4-[(3R-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2,5-diol
TQ3 CPG 1000Tide Quencher 3 CPG [TQ3 CPG] 1000
二水钙(100GM)Calcium Chloride, Dihydrate, CAS# 10035-04-8; MW 147.01; ≥99%
七水硫镁(5KG)Magnesium Sulfate, 7H2O, CAS# 10034-99-8; ≥98%
维生素B1(盐噻胺)(25GM)Thiamine HCl, CAS# 67-03-8; ≥99%
荧光素 荧光参照标准Fluorescein Fluorescence reference standard
7-甲氧基香豆素-3-羧,琥珀酰亚胺酯7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid, succinimidyl ester
SMCC [(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧琥珀酰亚胺酯]SMCC [4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexanecarboxylic acid N-hydroxysuccinimide ester]
小鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒实验方法二氢乙锭Hydroethidine [Dihydroethidium]
钙离子荧光探针腔肠素 cp 超级纯Coelenterazine f UltraPure grade
Tide Quencher 4 胺 [TQ4 胺]Tide Quencher 4 amine [TQ4 amine]
DiSC2(7) [3,3-Diethylthiatricarbocyanine iodide]DiSC2(7) [3,3-Diethylthiatricarbocyanine iodide]
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