小鼠泛素蛋白（Ub）elisa试剂盒操作步骤 返回列表页

小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤     英文名称：Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit       检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 
英文名称：Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit  
规格：96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状：盒装液体
人白介素2受体（IL-2R)Elisa测定试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。 9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤安全性
1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

石蕊杀菌素链霉菌 Streptomyces litmocidini

293A (人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2

野油菜黄单孢菌 Xanthomonas campestris

小双孢菌 Microbispora sp.

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus

草酸青霉 Penicillium oxalicum

KiMA(人胚肾上皮细胞系)5×106cells/瓶×2

MCF-7（MCF7）（ATCC来源）, 人腺细胞

小鼠肾上皮细胞*培养基100mL

小鼠肠粘膜上皮细胞*培养基100mL

人肺大动脉内皮细胞*培养基100mL

苹果链格孢 Alternaria mali

芽胞菌 Bacillus sp.

总状毛霉 Mucor racemosus

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis

链霉菌 Streptomyces sp. Proscillaridin A （25 mg）（3β）-3-[（6-deoxy-α-L-mannopyranosyl）oxy]-14-hydroxy-bufa-4，20，22-trienolide； A-32686|NSC 7521|PSC-801； Proscillaridin A

1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC （250 mg）1，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1，2-DSPC|Coatsome MC 8080|1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； 1，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC

ML-030 （5 mg）3-（2，5-dimethoxyphenyl）-6-（3，4-dimethoxyphenyl）-7H-1，2，4-triazolo[3，4-b][1，3，4]thiadiazine； CID-11757146； ML-030

GSK 3787 （10 mg）4-chloro-N-[2-[[5-（trifluoromethyl）-2-pyridinyl]sulfonyl]ethyl]-benzamide； GSK 3787

Cell-Based Assay Antimycin A （200 ul）Cell-Based Assay Antimycin A

CAY10679 （10 mg）1，1’-（1，8-dioxo-1，8-octanediyl）bis[glycyl-glycine； N，N’-bis（glycyl-glycine）-hexane-1，6-Dicarboxyamide； CAY10679

Lutein （5 mg）E 161b|FloraGLO|Xanthophyll； （6’R）-β,ε-carotene-3R,3’R-diol

5-Bromoisoquinoline （5 g）5-bromo-isoquinoline

Epigenetics Screening Library （96-Well） （100 ul）Epigenetics Screening Library （96-Well）

（±）11-HEPE （250 ug）（±）-11-hydroxy-5Z，8Z，12E，14Z，17Z-eicosapentaenoic acid； （±）11-HEPE

（±）5，6-DHET （25 ug）（±）5，6-dihydroxy-8Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid； （±）5，6-DiHETrE； （±）5，6-DHET

小鼠泛素蛋白(Ub)elisa试剂盒操作步骤MF63 （5 mg）2-

Yangonin （25 mg）4-methoxy-6-[（1E）-2-（4-methoxyphenyl）ethenyl]-2H-pyran-2-one

25N-NBOMe （hydrochloride） （5 mg）2；C-N-NBOMe； 2-（2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethanamine, monohydrochloride

Conduritol B epoxide （50 mg）CBE； 1,2-anhydro-myo-inositol