人凝血因子Ⅷ相关抗原（Ⅷ-Ag）elisa试剂盒实验方法 返回列表页

人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法     英文名称：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit      检测方法：elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存，操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题，收货后十五个工作日内包退换。 
英文名称：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit 
规格：96T/48T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
性状：盒装液体
人白介素2受体（IL-2R)Elisa测定试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法 实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法 样品收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法 操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。 9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 
注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与zui后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法 安全性
1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

Rabbit Anti-human IgM/Cy5  Cy5标记的兔抗人IgM规格: 0.1ml

IRS1  胰岛素受体底物-1抗体规格: 0.2ml

phospho-IKKi/IKKe(Ser172)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体规格: 0.1ml

TRPM6  瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体（M亚家族）规格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG  兔抗猪IgG规格: 1mg

CNOT2  细胞表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体规格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗人分泌型IgA规格: 0.1ml

phospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘着斑激酶抗体规格: 0.1ml

GRASP65  高尔基体外周膜蛋白p65抗体规格: 0.2ml

PTN/Pleiotrophin  多效生因子抗体规格: 0.1ml

AGPHD1  氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体规格: 0.2ml

ULBP2/N2DL2  UL16结合蛋白2抗体规格: 0.2ml

CD54/ICAM-1  细胞间粘附分子-1抗体规格: 0.1ml

SKALP/Elafin  弹性蛋白酶抑制剂抗体规格: 0.2ml

Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)  磷酸化细胞质膜微囊蛋白-1抗体规格: 0.1ml

A4GALT/CD77  α1,4-半糖基转移酶1规格: 0.2ml

phospho-PFKL (Ser775)  磷酸化6磷酸果糖激酶抗体规格: 0.1ml

LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗体规格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的驴抗豚鼠IgG规格: 0.1ml

ATRIP/TREX1  系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体规格: 0.2ml

IMPDH1  肌苷单磷酸脱氢酶1抗体规格: 0.2ml

Phospho-Stathmin(Ser38)  磷酸化原基因蛋白18抗体规格: 0.1ml

LY-96/MD-2  MD-2蛋白抗体规格: 0.1ml

Phospho-MARCKS (Ser152/156)  磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体规格: 0.1ml

CO4A2  胶原蛋白4a2亚基抗体规格: 0.2ml小鼠肾上皮细胞*培养基100mL

皮革正青霉 Eupenicillium alutaceum

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

NCI-H2452(人间皮瘤细胞)5×106cells/瓶×2gersion

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小角状节皮菌 Arthroderma corniculatum

小鼠腺上皮细胞*培养基100mL

大鼠皮肤肥大细胞*培养基100mL

铜绿假单胞菌 Pseudomnas aeruginose

中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

MA-782(小鼠腺细胞)5×106cells/瓶×2

嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

佛罗里达侧耳 Pleurotus florida

小鼠肥大细胞细胞英文名称：P815

人脑微血管内皮细胞*培养基100mL

荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens

嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus

HL-60, 人早幼粒白血病细胞

中国台湾根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺星状细胞*培养基100mL

人甲状腺滤泡上皮细胞*培养基100mL

人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)elisa试剂盒实验方法酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

弗氏链霉菌 Streptomyces fradiae

FaDu(人咽鳞细胞)5×106cells/瓶×2

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌

人腺成纤维细胞*培养基100mL