HT-29 (结肠癌细胞) 返回列表页

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

名称    HT-29 (结肠癌细胞) (STR鉴定正确)
别称 HT 29; HT29

种属 人类

年龄（性别） 女性，44岁

组织来源 结直肠腺癌

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 HT-29细胞是由J·Fogh在1964年用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的；近来，已建株的培养细胞用含相同血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤，也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。HT-29细胞合成IgA、CEA、蛋白绑定TGF-β的分泌成分和粘液素等。

生物安全等级 1

生长培养基 McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~36-60小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

受体表达情况 human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

基因表达情况 secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

保藏机构 ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201

使用方法：
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL  Dansyl chloride 100mg

Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL  DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次

Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg  DAB 法杂交试剂盒5次

AG490(JAK 抑制剂 )5mg  Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg

AICAR(AMPK 激活剂 )5mg  Cycloheximide50m
大鼠激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)elisa检测试剂盒

大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa检测试剂盒免费代测

大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa检测试剂盒

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa检测试剂盒

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa检测试剂盒
HT-29 (结肠癌细胞)仓鼠脂联素,含C1Q和胶原域(ADIPOQ)elisa分析检测试剂盒

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