NCI-N87 N87 (胃癌细胞) 返回列表页

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名称    NCI-N87 [N87] (胃癌细胞) (STR鉴定正确)
别称 NCI-N87

种属 人类

年龄（性别） 男性

组织来源 胃癌，来源于转移部位：肝

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72，并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。NCI-N87细胞的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体，它们表达蕈毒碱受体。没有证据表明，NCI-N87细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的重组。NCI-N87细胞表达的c-myc和c-erb-B2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因NCI-N87细胞不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽。据报道，NCI-N87细胞的植板率为4.3%。

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~48-80小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, the cells form tumors in athymic nude mice.

受体表达情况 acetylcholine, muscarinic, expressed

保藏机构 ATCC; CRL-5822
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

使用方法：
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
BCA 法蛋白定量试剂盒500 次  Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 ) 1mg

超敏型 BCA 法蛋白定量试剂盒500 次  PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )1g

还原剂兼容型 BCA 蛋白定量试剂盒250 次  PD 98059(MAPKK 抑制剂 )2mg

改良 Lowry 法蛋白定量试剂盒1000 次  PCR 专用 LIC 克隆套装1μg

蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mL  PCR 优化试剂盒1套
大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)elisa检测试剂盒

大鼠促性腺激素释放激素受体(GnRHR)elisa检测试剂盒免费代测

大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)elisa检测试剂盒

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NCI-N87 [N87] (胃癌细胞)大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)elisa检测试剂盒

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大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa分析检测试剂盒

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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。