RWPE-1 (正常前列腺上皮细胞) 返回列表页

产品属性：

名称    RWPE-1 (正常前列腺上皮细胞)
别称 RWPE1

年龄（性别） 男；54岁

组织来源 器官：前列腺； 疾病：正常； 细胞类型：上皮细胞

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的18(HPV-18)进行转化，建立了RWPE-1细胞株[PubMed:9214605]。在三维Matrigel培养时，在雄激素作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA[PubMed:11170142]。当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时，RWPE-1细胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并产生PSA。来源于RWPE-1细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99细胞株。另外，用N-甲醇-N(MNU)处理RWPE-1细胞，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。它们是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26细胞株。据提供者报道，RWPE-1细胞经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。

生物安全等级 2

生长培养基 K-SFM＋0.05mg/mL BPE＋5ng/mL EGF＋1% P/S

推荐传代比例 1:2-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~22 hours

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 No, in nude mice (with or without Matrigel). No, in soft agar.

受体表达情况 androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen)

抗原表达情况 kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen); (upon exposure to androgen)

基因表达情况 cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+

保藏机构 ATCC; CRL-11609

冷冻保存细胞之方法？
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
实验报告：
产品仅用于科研一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
B淋巴细胞新型蛋白1抗体

脑表达X连锁蛋白4抗体

EBV立即早期基因BRLF1抗体

区结构域相邻锌指蛋白1A抗体

巴德-毕德氏综合征蛋白BBS5抗体
大鼠白三烯B4(LTB4)elisa检测试剂盒免费代测

大鼠白介素9(IL-9)elisa检测试剂盒

大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)elisa检测试剂盒

大鼠白介素7受体(IL-7R)elisa检测试剂盒

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RWPE-1 (正常前列腺上皮细胞)大鼠CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)elisa检测试剂盒

大鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)elisa检测试剂盒

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