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人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa试剂盒保存 英文名称:Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit 检测方法:elisa酶联免疫分析法ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。其试剂稳定、易保存,操作简便。凡购买本公司试剂盒非人为质量问题,收货后十五个工作日内包退换。
人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa试剂盒保存一、标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa试剂盒保存二、注意事项
1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。
2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,
3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。
4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟
5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。
6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。
7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。
8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。
三、实验前准备
1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。
2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等
3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液
4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液
5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)
人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa试剂盒保存操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
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