A9 (小鼠皮下结缔组织细胞) 返回列表页

名称    A9 (小鼠皮下结缔组织细胞) (种属鉴定正确)
别称 A9; A9 (Hamprecht); A9(Hamprecht); AG 9; GM00346; GM-346; GM346

种属 小鼠

年龄（性别） 雄性，100天

组织来源 皮下结缔组织；疏松结缔组织和脂肪；正常

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 成纤维细胞样

背景描述 A9细胞是从野生型细胞株L中分离得到的。A9细胞对HAT选择培养基敏感，并缺失了腺苷转磷酸核糖基酶与次转磷酸核糖基酶；A9细胞对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)有抗性。

生物安全等级 1

生长培养基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice.

保藏机构 ATCC; CCL-1.4 ATCC; CRL-6319 BCRC; 60138
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细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

使用方法：
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

超快核酸转膜试剂盒5次  酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL

核酸印迹膜染液100mL  酵母 DNAout50 次

超级杂交液 A（不含甲酰胺）100mL  角质细胞生长因子5mL

超级杂交液 B（含甲酰胺）100mL  角质细胞生长因子 - 不含动物成分5mL

超级杂交液 (Oligo 探针 )10mL  角质细胞生长因子 - 不含 BPE5mL
D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1：18ml×1 R2：6ml×1 胶乳增强

β-羟丁酸D3-H试剂盒 R1：45ml×2 R2：15ml×2 酶比色法

同型半Hcy试剂盒 R1：37ml×2 R2：10ml×2 酶循环法

补体C3试剂盒 R1：45ml×1 R2：15ml×1 免疫浊度法

补体C4试剂盒 R1：45ml×1 R2：15ml×1 免疫浊度法
A9 (小鼠皮下结缔组织细胞)大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)elisa检测试剂盒

大鼠粒细胞克隆刺激因子(G-CSF)elisa检测试剂盒

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大鼠连环蛋白β1(CTNNβ1)elisa检测试剂盒