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供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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货号 | GOY-01X1279 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 仅供科研使用 |
名称 小鼠真皮微血管内皮细胞
2.组织来源:皮肤组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比,对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞,则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
5.方法简介:
公司实验室分离的小鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
6.质量检测:
公司实验室分离的小鼠真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
我司全程提供细胞生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、组织、冻存条件等复苏及冻存细胞株说明书信息,我们专业您的细胞系实验,让您实验再无烦扰!产品仅用于科研
产品名称 | 规格 | 货号 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1279 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
图
使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
十二烷基磺酸清除剂25mL MM1-43(FM®1-43)1mg
β- ,蛋白级10mL Mito-Tracker Green( 线粒体绿色荧光探针 )50μL
DTT,蛋白级5g miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次
DTT,免称量蛋白级48 管 miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×10mL
TCEP 盐酸膦1g miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×1.5mL
马窖蛋白Caveolin-1(CAV1)elisa检测试剂盒
马黄体生成素(LH)elisa检测试剂盒
马(cAMP)elisa检测试剂盒免费代测
马环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测试剂盒
马过氧化氢酶(CAT)elisa检测试剂盒
小鼠真皮微血管内皮细胞细菌外膜蛋白提取试剂盒50T
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒100T
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒50T
细菌总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T
细菌总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T
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