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T3 体外转录试剂盒50 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3. 电泳检测是否得到预计长度的 PCR 产物。
T3 体外转录试剂盒50 次*产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
产品介绍:
规格及成分:
NCI-H446(人小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
热带假丝酵母 Candida tropicalis
小鼠神经干细胞(EGFP标记)
大鼠成年表皮角质形成层细胞*培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)5×106cells/瓶×2
嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
白灵侧耳 Pleurotus nebrodensis人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit
人白介素16(IL-16)ELISA Kit
人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA Kit
人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA Kit
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA Kit
人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA Kit
人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA Kit
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA Kit
人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA Kit
人抗角蛋白抗体(AKA)ELISA Kit
人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)ELISA Kit
人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA Kit
人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA Kit
人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)ELISA Kit
人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA Kit
人生长激素释放肽gHRelin(GHRP-GHRelin)ELISA Kit
人糖胺聚糖(GAG)ELISA Kit
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA Kit
小鼠肺细胞英文名称:Lewis
人视网膜微血管内皮细胞*培养基100mL
无花果曲霉 Aspergillus ficuum
厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia
HO-8910(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2
塔宾曲霉 Aspergillus tubingensis
香菇 Lentinula edodes
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