SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7*直销 返回列表页

SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7*直销操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

SV40转化的非洲绿猴肾细胞；COS-7*直销现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞株源自CV-1细胞株，经转染起始点缺失的SV40病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV40 T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV40病毒的溶解性生长，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV40突变体的复制。因含有SV40病毒的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
传代方法  1：3传代；3-4天一次
传代情况 PN2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶 
染色体  51-129
使用权限 A类

运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
GNM(人口腔鳞颈淋巴结转移细胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. Lactis
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
RWPE1(人前列腺上皮细胞)5×106cells/瓶×2
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes
苏云金芽胞杆菌柏氏变种 Bacillus thuringiensis var. berliner
小鼠胰腺导管上皮细胞*培养基100mL
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
香菇 Lentinula edodes
786-O(人肾透细胞细胞)5×106cells/瓶×2
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
苜蓿中华根瘤菌
RL1(大鼠肺成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2
圣堡罗沙门氏菌 Salmonella saintpaul
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人前列腺上皮细胞*培养基100mL
人绒毛膜间充质基质细胞 Human
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
腊状芽胞杆菌 Bacillus cereus4次    大提柱式细 DNAout    
500U    尿嘧啶 -DNA 糖基化酶    
溴酚蓝    CAS115-39-9    5g
Y2HGold 酵母种    12-194    1mL
20 次    一站式 His 标记蛋白质微量纯化套装    
10 次    克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成试剂盒    
250mg    直链淀粉    
100mL    PRMI1640 培养基 ( 含 10% 胎牛血清 )    
100g    DNA  CTAB( 十六烷基*基溴化铵 )    
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC·7-AAD）     140625-20    20 次
DNA 电泳分子量标准 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ    90602H-50    50 次
100g    十二烷基硫酸    
100mL    动物 DNAout    
1g    6- 苄基氨基嘌呤    
0.5mL    链霉亲和素，AP 标记    
L-(+) 乳酸锂盐    CAS27848-80-2    5g
E-64 蛋白酶抑制剂，20mg/mL    130541-10    10mL
50 次    柱式昆虫 DNAout    
100mg    Monensin ( 蛋白转运抑制剂 )    
200 次    ATP 发光法细胞活力检测试剂盒    
250mL    动物 DNAout    
10mL    DNA 稀释液    
虾碱性磷酸酶    120403-300    300U