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杂交瘤细胞;1F2图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 杂交瘤细胞;1F2图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
组织蛋白酶K(CTSK)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Cathepsin K (CTSK)
雌激素受体β(ERβ)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Estrogen Receptor Beta (ERb)
脑钠素(BNP)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Brain Natriuretic Peptide (BNP)
髓过氧化物酶(MPO)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Myeloperoxidase (MPO)
钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)单克隆抗体Monoclonal Antibody to ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3)
90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)
视黄醇结合蛋白4(RBP4)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)
整合素α2B(ITGα2B)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Integrin Alpha 2B (ITGa2B)
蛋白酪氨酸磷酸酶受体S(PTPRS)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type S (PTPRS)
山梨醇脱氢酶(SDH)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Sorbitol Dehydrogenase (SDH)
B-细胞激活因子(BAFF)单克隆抗体Monoclonal Antibody to B-Cell Activating Factor (BAFF)
蛋白激酶Cα(PKCα)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Protein Kinase C Alpha (PKCa)
干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC)
钙蛋白酶2(CAPN2)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Calpain 2, Large Subunit (CAPN2)
去甲肾上腺素转运蛋白(NET)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Norepinephrine Transporter (NET)
鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR1)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1)
尿皮质素3(UCN3)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Urocortin 3 (UCN3)
细胞色素P450家族成员2D6(CYP2D6)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Cytochrome P450 2D6 (CYP2D6)
芳香烃受体核转位因子样蛋白(ARNTL)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL)200 次 柱式血液 DNAout
10mL 制霉菌素溶液 ,2mg/mL
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜不需高速离心 ) 18-0020-50 50 T
DNA PVP K30 溶液,20% 100865-100 100mL
5000U SP6 RNA 聚合酶
100 次 DNA PAGE 胶回收试剂盒
1.5mL 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )
1mL JM103 菌种
p19miRNA 检测试剂盒 130703-50 50 次
0.5mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD) 120668C-1 1个
250mg 四氮唑蓝 (NBT)
5次 大提柱式 Ti 质粒 DNAout
25 次 一站式真菌 mRNAout
10mL 膦酰二肽溶液,10mg/mL
NotI 17-0160 150U
显影粉 130808-1 1袋
100 次 胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒
25mg 多聚 -L- 赖氨酸 (3-7 万 )
1只 硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管
10000U 核糖核酸酶 RNase If
RACE 技术服务 R004-1 1次
ATP 溶液,2.5mM 131216-2 2mL
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