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杂交瘤细胞;SU-211-10图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 杂交瘤细胞;SU-211-10图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C6
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
脂多糖结合蛋白(LBP)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)
半胱氨酸丰富分泌蛋白2(CRISP2)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Cysteine Rich Secretory Protein 2 (CRISP2)
肌微管素相关蛋白9(MTMR9)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9)
核膜含血影蛋白重复蛋白1(Nesp1)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Nesprin 1 (Nesp1)
蛋白酶激活亚基3(PSME3)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)
复制启动因子1(REPIN1)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Replication Initiator 1 (REPIN1)
尿调蛋白(UMOD)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Uromodulin (UMOD)
受体活性修饰蛋白2(RAMP2)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Receptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2)
甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
亨廷顿蛋白(HTT)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Huntingtin (HTT)
D-氨基酸氧化酶(DAO)单克隆抗体Monoclonal Antibody to D-Amino Acid Oxidase (DAO)
苯胺素(ANLN)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Anillin (ANLN)
信号淋巴细胞激活分子家族成员7(SLAMF7)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7 (SLAMF7)
JNK1/MAPK8关联膜蛋白(JKAMP)单克隆抗体Monoclonal Antibody to JNK1/MAPK8 Associated Membrane Protein (JKAMP)
Tolloid样蛋白1(TLL1)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
无翅型MMTV整合位点家族成员9B(WNT9B)单克隆抗体Monoclonal Antibody to Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 9B (WNT9B)100 T 一氧化氮检测试剂盒 ( 化学法 )
2μg 克必隆 B 载体
50g 葡聚糖
500mL IMDM 培养基 ( 含 1% 双抗 )
100mL DNA SDS 溶液,10%
一站式生物素检测 TUNEL 试剂盒 (DAB 法 ) 81026-10 10 次
DNA 电泳分子量标准 (2)(300-5000 bp) 111108-50 50 次
25mg 生物素化的牛血清白蛋白
25g 叠氮
1Mu 青 G 盐
1mL 萤火虫荧光素
昆布多糖 CAS9008-22-4 100mg
抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL 130534-1 1mL
50 次 柱式粪便 RNAout
50μL Mito-Tracker Green( 线粒体绿色荧光探针 )
30 次 AMV cDNA *链合成试剂盒
50μL 电泳 SYBR Green I
0.1 mL×10 Stbl3 感受态细胞
CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 120511-100 100U
超快核酸转膜试剂盒 121110-5 5次
5次 TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒
200mL 电泳丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )
2500mL TBE 电泳液 ,10×
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