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小鼠杂交瘤细胞;HB KC-48图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称小鼠杂交瘤细胞;HB KC-48图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C6
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
MOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗体 规格:0.2ml
CKLFH4/CMTM4 趋化素样因子超家族成员4抗体 规格:0.2ml
Signal recognition particle 信号识别颗粒抗体 规格:0.1ml
CSTP1 钙调神经磷酸酶CSTP1抗体 规格:0.2ml
GIMAP8 GTP酶IMAP家族成员8抗体 规格:0.2ml
NIPA 间变性淋巴瘤激酶核相互作用伴侣蛋白抗体 规格:0.2ml
phospho-ATF2 (Thr55) 磷酸化活化复制因子2抗体 规格:0.1ml
Nitrotyrosine 硝基酪氨酸抗体 规格:0.2ml
phospho-PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗体 规格:0.1ml
FBXO28 FBXO28蛋白抗体 规格:0.2ml
VGLL1 转录辅助因子退变样蛋白1抗体 规格:0.2ml
PJA2/RNF131 环指蛋白131抗体 规格:0.2ml
KF1/ZFP103 锌指蛋白103抗体 规格:0.2ml
NFAT5 活化T细胞核因子5蛋白抗体 规格:0.2ml
VMAT2 脑单胺类神经递质转运蛋白抗体 规格:0.2ml4- 甲基伞形酮 CAS90-33-5 10g
小鼠抗 His 标签单抗 130573-1000 1000μL
5g 脂肪酶
10g L- 阿拉伯糖
100g 丙烯酰胺
10×100μL NMY51 酵母感受态细胞
番红 O CAS477-73-6 5g
盐酸胍溶液,8M 131120-200 200mL
50 次 柱式细菌 RNA-DNA 双提试剂盒
500g 磷酸氢二
10mg 牛甲状素蛋白
1000U PvuII
玉米素 CAS13114-27-7 5mg
植物 Actin 小鼠单抗 130570-30 30μL
非冻型组织 RNA 保存液 3060-100 100mL
25g 咪唑
0.5mL dGTP 溶液,100mM
4次 大提柱式细菌 DNAout( 含溶菌酶 )
200U 尿嘧啶糖基化酶抑制剂
丁酸 CAS156-54-7 1g
DNA 快速连接试剂盒 70602-30 30 次
20 次 一站式 His 标记蛋白质微量纯化套装
10 次 克必隆 eTS 核心试剂盒
100g 可溶性淀粉
RIMKLA/FAM80A 核糖体蛋白S6修饰样蛋白A抗体 规格:0.2ml
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗体 规格:0.2ml
C3orf33 3号染色体开放阅读框33抗体 规格:0.2ml
PAPP A2 娠相关浆蛋白A2抗体 规格:0.2ml
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