人喉癌上皮细胞；Hep-2图片 返回列表页

人喉癌上皮细胞；Hep-2图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人喉癌上皮细胞；Hep-2图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  zui初认为这个细胞源自喉上皮癌，但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现，该细胞已被HeLa污染；角蛋白阳性。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C360
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

维生素 D31g
动态浊度法内毒素定量试剂盒1.7mL×10 支
CAS25322-68-3聚乙二醇 3350250g
130420-1Protein G 琼脂糖1mL
终点显色法内毒素定量试剂盒32 次
LB 平板培养基 (Amp 抗性 )10 块
胶原酶Ⅳ型100mg
细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-PE）20 次
CAS18883-66-4链脲佐菌素100mg
70102C-10蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0KD)10 次
α- 环状糊精250mg
氯化锂 ( 无水 )100g
组蛋白25g
琥珀酸脱氢酶测试盒48 T
CAS9002-10-2多酚氧化酶 ( 菌菇 )25KU
101103D-1玻璃匀浆器 ,10mL1套
101119-5柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
NS-398(COX-2 抑制剂 )1mg
6- 羟基多巴胺5g
BCECF AM1mg
长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
22-0110-100Calcein M 100mg
17-016-96200 μL RNase-free 黄吸头 ( 盒装 )96 支
嘌呤霉素干粉25mg
白细胞裂解液100mL
Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制剂 )10mg
T3 RNA 聚合酶1000U70502-30石蜡包埋组织 DNAout30 次
柱式酱油 DNAout10 次
凝血酶1000U
TG1 化学感受态细胞0.1mL×10
CAS147-94-4β-D- 阿糖胞苷50mg
壮观霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次
脂蛋白 PAGE 染液1套
CAS77-86-1三 ( 羟甲基 ) 氨基甲烷100g
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
二甲基酸5g
DNA Shuffling 试剂盒10 次
21-0320-5 少突胶质前体细胞生长因子5mL
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V- 荧光素 555·7-AAD）50 次
醛基磁珠2mL
抗氟离子酸性磷酸酶检测试剂盒120 次 
Golgi-Tracker Red( 高尔基体红色荧光探针 )1mg
130612-500Bst DNA 聚合酶，全长500U
Y1090 菌种1mL
磷酸二酯酶Ⅰ100U
0.5mLDNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个
CAS53597-25-4鱼精蛋白硫酸盐1g
CAS69-78-35,5- 二硫代双 (2- 硝基苯甲酸 )1g
β －琼脂糖酶25U