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人高转移肝癌细胞;HCCLM3价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人高转移肝癌细胞;HCCLM3价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样;胞质内有颗粒
生长特性 贴壁生长
特征特性 用人肝癌细胞株MHCC97-H接种裸鼠,进行3次肺转移筛选,取肺转移瘤建成皮下接种后高度自发性肺转移的肝癌细胞系。
培养条件
传代方法
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
植物种属鉴定 PCR Mix 9100 次
3'-RACE 试剂盒10 次
90603B-5随机引物法 DNA 探针生物素标记试剂盒5次
活性氧检测试剂盒100 次
超氧化物歧化酶测试盒48 T
130595-100双荧光素酶报告基因检测试剂盒100 次
维生素 B65g
十二烷基磺酸100g
miRNA cDNA *链合成试剂盒25 次
柱式腐殖酸清除剂30 次
CAS9048-46-8牛血清白蛋白5g
植物种属鉴定 PCR Mix 5100 次
BL21 菌种1mL蟾毒灵规格:20mg/支;98%
人前列腺成纤维细胞*培养基100mL
小鼠骨髓瘤细胞英文名称:P3X63Ag8
NCI-H358(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
IBRS-2(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2
COS-7(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠艾氏腹水细胞英文名称:EAC
MCPC培养基添加剂/MCPC Medium Supplement每瓶添加于100ml MCPC培养基中5毫升国产/进口
茜素-β-半糖苷琼脂/Aliz-Gal Agar用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数250克国产/进口
L-O2(人正常肝细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名称:EMT-6
人卵巢透明细胞细胞英文名称:ES-2
仓鼠肾成纤维细胞英文名称:BHK-21 [C-13]
MDA-MB-453(人腺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
Annexin V-FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒规格:20次
产芽孢肉汤/Sporulation Broth产气荚膜梭菌的产芽孢培养250克国产/进口
亚碲酸盐肉汤基础/亚碲酸钠肉汤培养基基础/lurite Broth Base金黄色葡萄球菌的增菌培养,每100ml培养基需另加入1%亚碲酸钠1ml250克国产/进口
MFC(小鼠胃细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病细胞英文名称:M1
人肠微血管内细胞*培养基100mL
SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HL-7702(人肝正常细胞)5×106cells/瓶×2
1% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口
哺乳动物蛋白酶抑制剂1mL
MDS 42T7lac 菌种1mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 赖氨酸 (7-15 万 )25mg
90309-100红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL
蛋白磷酸酶抑制剂混合液 11mL
天净沙 Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20 次
131150-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记1000μL
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