Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-588图片

Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-588图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-588图片
形态特性上皮样
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法消化3-5分钟；1:2传代；3天内可长满。
传代情况 C3
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测阴性
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

60803-50可保种型蓝白 T 载体50ng
L-Canavanine(iNOS 抑制剂 )20mg
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 )2g
130675-250核糖核酸酶 HII250U
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 中 pH)30 次
酚 - 混合液 (DNA 提取 )100mL
DNA 探针变性液10mL
青链霉素溶液100mL
CAS37326-33-3透明质酸酶100mg
80904-5大提柱式真菌 RNAout5次
DNA 促旋酶 (E.coli)100U
dITP 溶液，2.5mM2mL
140626-50细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC）50 次
19-0140-500McCoy's5A 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )500mL
70303-1.5绿如蓝核酸染料 (UV)1.5mL
谷氨酰胺测试盒48 T
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC·7-AAD） 20 次
23-0650-1SB203580(p38MAPK 抑制剂 )1mg
胎盘碱性磷酸酶检测试剂盒100 次
维生素 B110g
天狼猩红5g
RNase A 溶液，10mg/mL1.5mL
120623-500β- 琼脂糖酶Ⅰ500U
乙酰丁香酮1gEJ(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2
LB琼脂/LB Agar大肠杆菌增殖250克国产/进口
葡萄糖铵培养基/Ammonium Dextrose Medium志贺氏菌的葡萄糖铵试验250克国产/进口
PA319(人大肠细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肾系膜细胞*培养基100mL
人脑微血管内细胞*培养基100mL
大鼠肠微血管细胞*培养基100mL
RKO-AS45-1(人结肠转基因细胞)5×106cells/瓶×2
MSC, 小鼠雪旺细胞gersion
GNM(人口腔鳞颈淋巴结转移细胞)5×106cells/瓶×2
Hela S3(人宫颈细胞)5×106cells/瓶×2
黄芪甲苷规格：100mg/支；98%
糖发酵管BR20支国产/进口
SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HCCLM3(人高转移肝细胞)5×106cells/瓶×2
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
LBS琼脂/酸菌选择性琼脂/LBS Agar用于酸杆菌的检测250克国产/进口
葡萄球菌增菌肉汤/Staphylococcus Enrichment Broth凝固酶阳生葡萄球菌选择性增菌250克国产/进口
PC-3M(人前列腺细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肾小管上细胞*培养基100mL
人内脏脂肪细胞*培养基100mL