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Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-555图片
形态特性  上皮样；多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

磷酸化蛋白纯化试剂盒50 次
牛血红蛋白5g
Taq DNA 聚合酶5000U
*0F' 菌种1mL
90205-500RNase A 干粉500mg
130833-1LAMP 可见光染料1mL
微球菌核酸酶5000U
HMS174（DE3）菌种1mL
甜菜碱盐酸盐100g
酸水解酪素100g
CAS68988-92-1瑞氏色素5g
21-0050-5动物上皮细胞生长因子5mL
111201-50痰液 DNAout50 次
RAPD PCR 试剂盒 ( 含银染 )100 次
DEAE 葡聚糖凝胶 A-2525g
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )5次
Tma 核酸内切酶 III500U
CAS6976-37-0双 (2- 羟乙基 ) 亚氨基三 ( 羟甲基 ) 甲烷5g
12-268GS200 酵母菌种1mL
一氧化氮合成酶测试盒24 T5-Methoxy-pyridin-3-ylamine3-氨基-5-氧基吡啶64436-92-6
(S)-3-Ami-N-Boc-piperidine(S)-1－叔丁氧羰基－3－氨基啶625471-18-3
Boric acid酸11113-50-1
(R)-1-CBZ-3-PYRROLIDINOLR-1-苄氧羰基－羟基吡咯100858-33-1
TRANS-8-METHYL-6-NONENOYL CHLORIDE反-8-基-6-壬酰95636-02-5
Weak Acid Red A弱酸性红A
Calcium钙标准溶液7440-70-2
METHYL RICINOLEATE蓖麻油酸酯141-24-2
Glyoxylic acid乙酸298-12-4
5-IODO-2-METHYLANILINE5-碘-2-基胺83863-33-6
NA5-腺苷一磷酸二(六水)(AMP)
2',4',6'-TRIMETHYLACETOPHENONE三基乙酰丙1667-01-2
Fmoc-N-methyl-D-valineFmoc-N-基-D-缬氨酸103478-58-6
3-Chloro-2,2-dimethyl-1-propanol3--2,2-二基-1-丙醇13401-56-4
2-Methylhydroquinone基氢醌95-71-6
2-Amino-6-bromopurine2-氨基-6-溴嘌呤82499-03-4
2,4-Dimethylbenzoic acid2,4-二基酸611-01-8
FMOC-L-IsoleucineFmoc-L-异亮氨酸71989-23-6
Palladium diacetate醋酸钯3375-31-3
ACETYLCHOLINE IODIDE碘化乙酰胆2260-50-6