Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-554说明书 返回列表页

Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞；PANC-1-Cas9-554说明书现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  上皮样；多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。CAS103-47-92-( 环己胺基 ) 乙烷磺酸5g
140384-10GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL
新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
核酸内切酶 VIII1000U
N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯1g
β- 乙醇，蛋白10mL
CAS9001-40-5葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶1000U
100820-250干粉型 LB-Lennox 培养基250g
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 高 pH)30 次
剪切式匀浆机1台
氯化乙酰胆碱1g
AMPPD100mg
CAS224967-52-6次甲基绿1g
120534-20兔抗 GST 标签多抗20μL
支气道上皮细胞生长因子5mL
快流速 DEAE- 琼脂糖凝胶25mL
硫酸铵100g
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL
CAS13292-46-1利福平250mg
131053-5DTT，蛋白5g
柱式微生物基因组 DNAout 50 次2-Naphthalenethiol2-萘硫酚91-60-1
3,4-Dibromothiophene3,4-二溴噻吩3141-26-2
Hydroxypropyl cellulose羟丙基纤维素9004-64-2
Artemether蒿71963-77-4
EUGENOL ACETATE乙酸丁香酚酯93-28-7
Glucose-13C葡萄糖－13C
2-Chlorobutane代仲丁烷78-86-4
2,5-dioxo-1,4-cyclohexanedicarboxylic acid dimethyl ester2,5-二氧酰基-1,4-环己二6289-46-9
Benzyl 2-bromoacetate2-溴乙酸苄酯5437-45-6
OXINE-COPPER8-羟基喹啉铜13014-03-4
Polymyxin B sulfate硫酸多粘菌素B1405-20-5
Molybdenum trioxide三氧化钼1313-27-5
3-Methylbenzyl cyanide间基乙2947-60-6
Hydroxypropyl methyl cellulose羟丙基基纤维素9004-65-3
DL-HistidineDL-组氨酸4998-57-6
POLYISOBUTYLENE聚异丁9003-27-4
4,4'-Dimethyldiphenylsulfoxide4,4'-二亚砜1774-35-2
Tangeretin桔皮素481-53-8
Aprotinin抑肽酶9087-70-1
2,2,2-Trichloroacetamide2,2,2-三乙酰胺594-65-0