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TSC22敲除的人乳腺癌细胞；231-Cas9-TSC22KO-553价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

TSC22敲除的人乳腺癌细胞；231-Cas9-TSC22KO-553价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是利用Crispr/Cas9技术敲除了MDA-MB-231的部分TSC22基因，Western Blotting检测发现该克隆无TSC22蛋白表达。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9,13；vWA：15,18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

Stb12 菌种1mL
DNA 电泳分子量标准 (100-600 bp)50 次
凝固血液 DNAout100 次
Origami(DE3)plysS 菌种1mL
120401-100热启动 Taq DNA 聚合酶100U
120668L-115mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个
苏木素染色液15mL
大提柱式血液 RNAout5次
酵母电转感受态细胞制备试剂盒20 次
Tuner(DE3)plysS 感受态细胞0.1mL×10
120413-600核糖核酸酶 H600U
131167-10DNA 溶解液10mL
糖蛋白染色试剂盒10 次
E-64 蛋白酶抑制剂，20mg/mL10mL
即用型高保真 PCR 试剂盒9mL
RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )3000U
31RNAi，RNA 干扰载体及基因片段等2 μg
140450-24单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次
无内毒素萤火虫荧光素25mg
GSH—ST 测试盒100 T
3-BROMOPHENETHYL ALCOHOL3-溴乙醇28229-69-8
1,4-Dihydroxyanthraquinone1,4-二羟基蒽醌81-64-1
POLY(DIMETHYLSILOXANE) ETHERIMIDE氨丙基封端聚二基硅氧烷99904-16-2
2-Chloro-6-methoxypyridine2--6-氧基吡啶17228-64-7
BOC-ORN-OH叔丁氧羰基-L-鸟氨酸21887-64-9
Tetrabutylammonium fluoride trihydrate四丁基化铵,三水87749-50-6
Xanthan gum黄原胶11138-66-2
2-Amino-5-methoxybenzoic acid2-氨基-5-氧基酸6705/3/9
1-METHYLCYCLOPROPANE-1-CARBOXYLIC ACID1-基环丙烷-1-羧酸6914-76-7
Z-TYR(BZL)-OHO-基-N-叔丁基羰基-L-酪氨酸16677-29-5
Aluminium phosphate磷酸铝7784-30-7
PARGYLINE HYDROCHLORIDE优降306-07-0
3-[N-Tris(hydroxymethyl)methylamino]-2-hydroxypropanesulfonic acid sodium salt3-[N-三(羟基)氨基]-2-羟基丙磺酸105140-25-8
plantamajoside大车前苷104777-68-6
NorvalineL-正缬氨酸6600-40-4
NA醇中多环芳烃混合标样
tert-Butyldimethylsilyl chloride叔丁基二基硅烷18162-48-6
Nitenpyram啶虫胺150824-47-8
Sclareol香紫苏醇515-03-7
(S)-(+)-2-Amino-3-methyl-1-butanolL-缬氨醇2026-48-4
亲和素1mg
LAMP 扩增阳性对照50 次