Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书 返回列表页

Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-550说明书现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
传代方法  1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9；vWA：15,18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存：
采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。
保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存
用途：只可用于科研。
储存：液氮。
运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。
注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。牛血清白蛋白标准品，2mg/mL1mL
Calcein M 100mg
非冻型血液 DNA 保存液250mL
Protein G 琼脂糖1mL
120505-500Dam 甲基转移酶500U
130997-10Sephadex G50 介质10mL
TCEP 盐酸膦1g
电泳 TEMED1.5mL
TBE 电泳液 ,10×250mL
DNA 修复混合液 30 次
131090-10中性亲和素蛋白10mg
130605-50即用型多重 PCR 试剂盒50 次
脱氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )25mg
放线酮溶液 ,100mg/mL1mL
甲叉双丙烯酰胺25g
M13mp18DNA10μg
CAS11096-37-0apo- 转铁蛋白10mg
120515-20即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次
嘌呤5g
固蓝 RR 盐5g
金胺 O5gDL-TryptophanDL-色氨酸1954/12/6
NAPHTHENIC ACID SODIUM SALT环烷酸61790-13-4
DL-3-AMINOBUTYRIC ACIDDL-3-氨基丁酸541-48-0
Standard solution for the verification of ICP-OESICP光谱仪检定溶液标准物质
Allopurinol别嘌醇315-30-0
2-Aminobenzotrifluoride2-氨基三88-17-5
L-Epinephrine hydrochloride酸肾上腺素55-31-2
Disodium phosphate dodecahydrate磷酸氢二,十二水10039-32-4
2,6-DIBROMOBENZALDEHYDE2,6-二溴67713-23-9
1-Cyclohexene-1-carboxylic acid环己酸636-82-8
2-Ethylhexylamine2-乙基己胺104-75-6
Nitroate cellulose sheets酸纤维素薄膜
N-Benzyl-4-piperidoneN-苄基啶3612-20-2
N-NITROSOMORPHOLINEN-亚基啉59-89-2
Stearic acid硬脂酸1957/11/4
5-Fluoroindole5-吲哚399-52-0
(TRIISOPROPYLSILYL)ACETYLENE三异丙基硅基乙炔89343-06-6
1,2,4-Triazolo[4,3-a]pyridin-3(2H)-one吡啶三唑6969-71-7
Methyl L-prolinate hydrochlorideL-脯氨酸酯酸2133-40-6
Cyclobutanol环丁醇2919-23-5
2-Methoxy-4-nitroaniline2-氧基-4-基胺97-52-9
P-AMINOBENZAMIDE GLYCINE对氨基酰甘氨酸
MANGANESE(II) ACETYLACETONATE乙酰丙锰(II)14024-58-9