Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-549价格 返回列表页

Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-549价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；231-Cas9-549价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
传代方法  1:2~1:4传代；每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：21,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,8；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9；vWA：15,18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

ScarabXpress T7lac 菌种1mL
DNase I 干粉100mg
胶回收及 PCR 片段纯化两用试剂盒50 次
脂蛋白纯化试剂盒50 次
CAS16672-87-0乙烯利25g
90508-20包涵体微量纯化试剂盒20 次
增强型天狼猩红染色试剂盒100mL
链亲和素0.1mg
15mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个
AG490(JAK 抑制剂 )5mg
一站式 CTAB-PAGE 电泳套装30 次
18-0740-24总抗氧化能力测试盒 ( 比色法 )24 T
70907-100去离子甲酰胺100mL
TG1 菌种1mL
非冻型组织 DNA 保存液250mL
Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯10g
植物种属鉴定 PCR Mix 3100 次
CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 K-30100g
100831-1005- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)100mg
130834-500RNase 抑制剂 ( 猪源 )500UNAPSB（磷酸缓冲液pH7.2）
2-Bromobutyric acid2-溴丁酸80-58-0
4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GALACTOPYRANOSIDE4-基-α-D-吡喃半乳糖苷7493-95-0
Hydantoin海因461-72-3
LITHIUM NIOBATE铌酸锂12031-63-9
2,6-Dichloroaniline2,6-608-31-1
PINORESINOL DIGLUCOSIDE(P)(PLEASE CALL)松脂醇二葡萄糖苷63902-38-5
4-CHLORO-6-ETHYL-2-PYRIMIDINAMINE2-氨基-4--6-乙基嘧啶5734-67-8
Nickel(II) acetate tetrahydrate乙酸镍6018-89-9
Trifluorothymine5-三基尿嘧啶54-20-6
alpha,alpha-Diphenyl-4-piperidinomethanolα,α-二基-4-啶醇115-46-8
Dioscin薯蓣皂甙19057-60-4
Bis-(3-phthalyl anhydride) ether4,4′-联二酐1823-59-2
Chlorophenol Red酚红4430-20-0
2,7-Dibromonaphthalene2,7-二溴萘58556-75-5
2-Chlorobenzonitrile邻873-32-5
Ethyl oxalyl monochloride草酰单乙酯4755-77-5
Pyridoxamine dihydrochloride吡哆胺二酸524-36-7
Aluminum oxide氧化铝1344-28-1
2,6-Dichlorotoluene2,6-二118-69-4
Alkaline Peptone Water性蛋白胨水
4-Amino-m-cresol4-氨基-3-基酚2835-99-6